Содержание

Чем нас лечат: Candida auris. Чем опасен и как с ним бороться

Согласно гайдлайну (официальным рекомендациям) американских Центров по предотвращению и контролю распространения заболеваний, причиной для подозрений будет отсутствие гиф и псевдогиф — тонких нитей, формирующих грибницу (хотя иногда при высевании Candida auris все-таки их образует). Уточнить диагноз можно при помощи метода матрично-активированной лазерной десорбции/ионизации (МАЛДИ), при котором импульсы лазерного излучения воздействуют на матрицу, где находится изучаемое вещество. Если МАЛДИ не опровергает вину Candida auris, американским врачам предлагается алгоритм в несколько шагов, который поможет отбросить другие варианты. Даже не вдаваясь в детали, видно, что занятие это явно не для домашнего досуга, да и не в каждой российской клинике есть нужное оборудование. Доступность методов молекулярной биологии в каждой районной поликлинике, повышать которую призывают авторы обзора в Nature Reviews Disease Primers, безусловно, облегчила бы задачу, но сегодня для российских реалий это что-то из области фантастики.

Неуязвимых грибков нет, но это не точно

Бороться с грибками в среднем гораздо сложнее, чем с бактериями, ведь многие противогрибковые антибиотики вредят и человеку, поскольку наши клетки имеют больше общего с клетками грибов, чем бактерий. С Candida auris и здесь дело обстоит еще хуже, чем со многими другими грибками. С клиническими испытаниями против этого конкретного вида грибков все плохо из-за его устойчивости: для контрольной группы трудно подобрать и пациентов (которые находятся в очень тяжелом состоянии в разных госпиталях и могут умереть всего через три месяца после поражения), и препарат. Назначать плацебо пациентам с опасным для жизни диагнозом — просто преступление, а хороший, действенный препарат («золотой стандарт» лечения), с которым можно было бы сравнивать новые лекарства, тоже подобрать трудно, ведь устойчивость быстро распространяется. Поэтому, как часто случается с антибиотиками и дезинфицирующими средствами наружного применения, методы лечения испытывают «в пробирке».

Однако, как мы понимаем, у этого подхода есть свои минусы, ведь поражает грибок внутренние органы, а не просто полости или поверхность тела, где среда (а следовательно, и предсказанная эффективность лечения) может отличаться.

Согласно статье в Clinical Infectious Diseases, в исследованиях in vitro (то есть в пробирке/на чашке, где выращивают посевы грибка) 90% штаммов Candida auris, собранных на трех континентах, устойчивы к флуконазолу, а 35% — к амфотерицину В. 41% штаммов нельзя было убить сразу двумя видами лекарств. Лишь некоторые триазолы могут бороться с грибками лучше (среди них авторы статьи отметили позаконазол, итраконазол и изавуконазол). Постоянно возникают и новые штаммы, которые могут быть более устойчивыми или более опасными — например, в этой работе описан штамм из Израиля, отличающийся от всех уже известных.

Прошлогодний обзор на страницах Science, посвященный резистентности грибков, указывает на не самые очевидные причины ее появления. Это, к примеру, азолы — огромная группа противогрибковых препаратов, которые давно стали доступными (что немаловажно и с финансовой точки зрения). Их повсеместно применяют не только для лечения людей, но и в ветеринарии, для защиты сельскохозяйственных растений от грибков, в покрытиях, предохраняющих от гниения древесину и пиломатериалы. Неудивительно, что в огромном количестве разнообразных местообитаний у самых разных грибков независимо возникают мутации, которые помогают им пережить азольную атаку. Обмениваясь ценными защитными признаками и передавая их потомкам, грибки становятся неуязвимы к новым и новым видам человеческого «оружия». То есть проходят почти тот же путь, что и бактерии, приобретающие резистентность к антибиотикам.

Чтобы избежать глобального коллапса, авторы обзора призывают развивать «разумное отношение к использованию известных нам химикатов, продвигать новые открытия противогрибковых препаратов и улучшать существующие технологии в поисках альтернативных решений». Звучит очень размыто — и мало касается личного выбора каждого, ведь в промышленных масштабах такие решения принимают корпорации и государства.

Зато каждый из нас может внимательнее относиться к фунгицидам на своем огороде и, не используя антибиотики без надобности, поступать так же и с противогрибковыми препаратами.

Indicator.Ru рекомендует: начните с борьбы с паникой и незнанием

Как мы выяснили, жертвами грибка становятся люди, здоровье (а иногда и жизнь) которых уже находится под угрозой. Странно советовать читателю не попадать в реанимацию, не болеть раком, ВИЧ, тяжелыми аутоиммунными заболеваниями или не пересаживать органы, ведь в этих случаях спасти жизнь могут препараты, подавляющие естественный иммунитет. Никто не спорит, что лучше быть здоровым и богатым, чем бедным и больным. Но если ваши близкие или вы все же оказались в такой ситуации, постарайтесь узнать, известны ли случаи инфицирования грибком в этой клинике. Если да, авторы нашумевшей статьи в The New York Times советуют попросить принять дополнительные меры предосторожности — хотя врачи и без этого будут стараться их принимать, если такая опасность есть.

За больным в тяжелом состоянии нужно внимательно следить, и если появится подозрение на грибковое поражение внутренних органов, следует пройти доступные вам тесты — хотя бы чтобы успокоиться и исключить вероятность, что вы имеете дело с Candida auris.

Самолечением заниматься бесполезно — напомним, сами вы даже не поставите верный диагноз. Профилактика противогрибковыми препаратами обычно от кандидозов не помогает. К примеру, о кетоконазоле этот факт известен уже пару десятилетий. Напротив, чрезмерное использование лекарств, когда в них нет прямой необходимости, может стать причиной распространения устойчивости. При этом простые средства дезинфекции могут быть довольно надежным методом: к примеру, в этой работе пероксид водорода побеждает

Candida auris в лабораторных условиях, хотя уже встречаются и устойчивые к нему штаммы.

Кроме того, эхинокандины — представители еще одного класса противогрибковых лекарств (помимо уже упомянутых азолов и амфотерицина В) — действенны против большинства штаммов Candida auris как минимум in vitro (1, 2) и на мышиных моделях. Правда, для того чтобы они сработали, нужна большая концентрация, чем против других грибков рода Candida. Но пока за ними не зря держится имя «противогрибкового пенициллина»: последний оплот еще держится, и устойчивость к нему пока что редка.

А в сочетании с некоторыми азолами сила эхинокандинов может возрасти. Согласно исследованию Американского микробиологического общества, микафунгин и вориконозол усиливают эффект друг друга.

Понравился материал? Добавьте Indicator.Ru в «Мои источники» Яндекс.Новостей и читайте нас чаще.

Подписывайтесь на Indicator.Ru в соцсетях: Facebook, ВКонтакте, Twitter, Telegram, Одноклассники.

В США нашли «неуязвимую» грибковую инфекцию

Грибки рода Candida под микроскопом

Wikimedia Commons

Центры по контролю и профилактике заболеваний США (CDC) выпустили Недельный доклад по заболеваемости и смертности (MMWR), в котором сообщается о появлении на территории страны новой разновидности кандидоза. Ее вызывает грибок Candida auris, обладающий множественной лекарственной устойчивостью. Как говорится в докладе, с мая 2013 года по август 2016 года в США зарегистрировано семь случаев заболевания. Еще шесть случаев зафиксированы после подготовки документа.

C. auris впервые выделили в Японии в 2009 году. Ретроспективный анализ коллекций грибков рода Candida показал, что первый из известных образцов был получен в 1996 году в Южной Корее. К настоящему времени случаи вызываемой этим грибком инфекции зафиксированы в Японии, Южной Корее, Индии, Пакистане, ЮАР, Кении, Кувейте, Израиле, Венесуэле, Колумбии, Великобритании и, недавно, в США и Канаде. Анализ ДНК показал, что в пределах одного региона штаммы 

C. auris весьма схожи, но существенно отличаются в разных областях мира. Это может свидетельствовать о независимом появлении нового грибка в нескольких регионах в близкое время.

Из семи первых американских случаев заболевания три наблюдались в Нью-Йорке, два в Иллинойсе и по одному в Мэриленде и Нью-Джерси. У пяти пациентов C. auris обнаружили в крови, у оного — в моче, и еще у одного — в ухе. Все они страдали тяжелыми сопутствующими заболеваниями и длительно лечились в стационаре. Один из пациентов прибыл на лечение с Ближнего Востока, остальные были местными и не выезжали за пределы США в обозримом прошлом. По состоянию на 31 августа четыре заболевших скончались, причем смерть не обязательно была связана с грибком. Полногеномный анализ возбудителей, проведенный у шести пациентов, показал, их близкое родство. Шесть поздних случаев инфекции изучаются в настоящее время.

C. auris вызывает инфекции у пациентов стационаров. Наибольшему риску подвергаются больные, длительно пребывающие в отделении интенсивной терапии, имеющие катетер в крупной вене или получавшие терапию антибиотиками и противогрибковыми препаратами.

С грибком связаны серьезные опасения, поскольку он устойчив к большинству распространенных лекарств, его практически невозможно идентифицировать традиционными методами (из-за этого его часто принимают за другие, менее опасные дрожжи) и вызывает внутрибольничные вспышки инфекции, требующие быстрого выявления и локализации.

C. auris может вызывать воспаление ушей (видовое название от лат. auris — ухо), ран и проникать в кровь, распространяясь по организму. Его выделяли из анализов мочи и мокроты, но может ли он вызывать инфекции дыхательных и мочевыводящих путей, пока неясно.

Большинство штаммов C. auris чувствительны к эхинокандинам, но не другим противогрибковым средствам. Встречаются разновидности грибка, устойчивые к трем основным классам противогрибковых средств, для их лечения используют комбинации разных по действию препаратов в максимальных дозах.

Согласно сообщениям о немногих зафиксированных случаях инфекции, умерли около 60 процентов страдавших ей пациентов. Однако сколько из этих случаев связано именно с C. auris, сказать сложно, поскольку он поражал преимущественно людей с серьезными заболеваниями, которые сами по себе могли привести к смерти.

С деятельностью грибков связали еще одно недавно выявленное заболевание — экзогенный аллергический альвеолит при длительной игре на волынке, получивший название «легкое волынщика». Повреждение легких при нем вызвано реакцией иммунной системы на плесневые грибки, обитающие в музыкальном инструменте.

Олег Лищук

Вагинальный кандидоз: 7 наболевших вопросов

Оглавление

Кандидоз («молочница») – грибковое поражение слизистого эпителия (от латинского наименования дрожжеподобных грибов: Candida – «белый»).

Грибок-возбудитель имеет несколько разновидностей, в наших широтах преобладает Candida albicans, который относится к условно-патогенной микрофлоре – при нормальной работе иммунитета его носительство не является заболеванием и не вызывает дискомфорта. Симптомы появляются при нарушениях иммунного статуса или под воздействием внешних факторов – грибок поражает слизистые оболочки (ротовую полость, кишечник и т. д.).

У женщин чаще всего встречается кандидоз влагалища.

Что приводит к кандидозу?

  • ВИЧ, иммунодефициты
  • Беременность
  • Мощные стрессы
  • Длительный прием эстрогенов
  • Глюкокортикоиды
  • Травмирование слизистой: конизация шейки матки, аборты, роды, эрозии
  • Антибактериальная терапия: уничтожая патогенные бактерии, антибиотики также удаляют микробы нормофлоры – естественную защиту слизистых от внедрения грибков
  • Прием цитостатиков (химиопрепаратов, подавляющих рост опухолей)
  • Иммунодепрессанты (подавляющие иммунитет)
  • Радиотерапия (облучение)
  • Проникновение извне нетипичных грибков – Candida tropicalis или др.

Как развивается кандидоз?

Естественную защиту обеспечивают не только гуморальные факторы (белки крови), но и собственная нормофлора: преобладание лактобактерий во влагалище подавляет рост грибков. Нарушение микрофлоры из-за травмы, приема лекарств, а также проникновения грибков извне, при нарушении гигиены, позволяет кандидам интенсивно размножаться.

Оседая на стенках полового тракта грибки травмируют эпителий и плотно спаиваются со слизистой. Продукты их жизнедеятельности закисляют среду влагалища и раздражают чувствительные нервы. При попадании этих продуктов в кровь запускается иммунная реакция, проявляющаяся воспалением. При чрезмерном иммунном ответе возникают аллергические реакции, которые ухудшают симптомы заболевания.

Результатом поражения половых путей грибками Candida становятся белые выделения, напоминающие творожные хлопья, состоящие из слущенного эпителия, слизи и массы грибков, а также комплекс легко узнаваемых симптомов.

Как проявляется молочница?

Наиболее показательными для диагностики заболевания являются творожистые выделения, которые могут отличаться объемами, плотностью, консистенцией, иметь желтоватый оттенок и даже принимать форму довольно крупных комочков.

Почти всегда выделениям сопутствует зуд, часто нестерпимый, жжение, ощущение тяжести, распирания во влагалище, отечность и покраснение видимых слизистых. Может появляться болезненное мочеиспускание, боли во время полового акта.

Симптомы могут усиливаться после тепловых процедур, в жаркую погоду, при долгом сидении.

При хроническом течении грибковой инфекции, частых рецидивах клиническая картина может стираться, некоторые симптомы отсутствуют – грибковая инфекция выявляется случайно при анализе мазка.

Как протекает вагинальный кандидоз?

Выделяют 4 формы заболевания:

  • Острый кандидоз – характерны обильные выделения, зуд, боль, жжение половых органов. Яркие клинические проявления сохраняются до недели, затем постепенно стихают. Симптомы общей интоксикации отсутствуют, температура нормальная
  • Хронический кандидоз – заболевание возвращается при наличии располагающих факторов, но протекает не столь бурно, часто бессимптомно. Может осложняться присоединением вторичной инфекции, так как слизистая постоянно травмируется грибком. Тяжело протекает при сахарном диабете, лейкозах
  • Рецидивирующий кандидоз – чередование обострений (более 4-х в год) и ремиссий
  • Носительство – грибки постоянно живут на слизистой половых путей, но не размножаются, так как подавляются нормофлорой и факторами иммунной защиты

Чем опасен кандидоз для беременных?

У беременных вагинальный кандидоз требует лечения, несмотря на то, что прямо не влияет на вынашивание ребенка и течение родов:

  • Повреждающее действие грибка на слизистую и сильное воспаление могут спровоцировать развитие вторичной инфекции в условиях сниженного иммунитета при незначительных погрешностях в гигиене, что может привести к внутриутробному инфицированию плода
  • При прохождении ребенка по родовым путям может произойти обсеменение, которое проявится у новорожденного стоматитом, отитом, синуситом или поражением ЖКТ

Лечение вагинального кандидоза беременных предполагает тщательный выбор терапии, взвешенное соотнесение пользы и вреда.

Как устанавливается диагноз?

Диагностикой и лечением кандидоза занимается врач-гинеколог. Он проводит визуальный осмотр на кресле, берет биологический материал (урогенитальный мазок).

Исследование материала может производиться двумя методами:

  • Микроскопия мазка – это рассматривание мазка на предметных стеклах под микроскопом. Позволяет определить количество грибка, оценить уровень воспаления по количеству лейкоцитов
  • Бакпосев (анализ на микрофлору) – помещение материала на питательную среду и выращивание с целью выявления возбудителя. Позволяет также определить чувствительность грибка к лекарствам

Как лечить кандидоз?

Лечение вагинального кандидоза включает:

  • Прием противогрибковых препаратов
  • Антибиотиков
  • Противомикробных препаратов
  • Глюкокортикостероидов (в комплексной терапии)
  • Комбинированных препаратов (противогрибковые антибиотики трех разных групп, антибиотики + противомикробное + противогрибковое средство + глюкокортикостероид)
  • Спринцевания или ванны с раствором соды

Большая часть современных лекарств выпускается не только в таблетированном виде, но и в форме вагинальных таблеток, капсул, свечей, кремов. Они применяются местно и не оказывают системного действия, поэтому могут назначаться беременным и кормящим женщинам.

Преимущества проведения процедуры в МЕДСИ

  • Практикующие акушеры-гинекологи МЕДСИ следят за актуальными мировыми тенденциями в лечении
  • Возможность экспресс-диагностики
  • Индивидуальный подход к каждому пациенту, подбор схемы лечения с учетом особенностей организма
  • Наблюдение в динамике, коррекция схемы лечения, скидка на повторный прием

Для записи на прием звоните по телефону 8 (495) 7-800-500 (работает круглосуточно).

Кандидоз — КВД №2

Что такое «молочница» (кандидоз)?

Около 75% женщин в течение детородного возраста переносят молочницу или кандидоз, который вызывается дрожжеподобными грибами рода Кандида. Заболевание это протекает в виде кандидозного вагинита или вульвовагинита. Эти грибы в норме обитают на коже, во рту, в кишечнике и во влагалище. У 20% здоровых женщин детородного возраста в половых путях обнаруживаются грибы рода Кандида. Ненормально быстрый рост грибов, замещает «хорошие» бактерии и вызывает воспаление влагалища с клиническими проявлениями. Наиболее часто это происходит у молодых сексуально активных женщин и это часто диагностируемое заболевание.

Кандидозный вагинит (КВ), в общем, не входит в группу инфекций, передаваемых половым путем, однако возможно заражение этой инфекцией от партнеров, у которых грибы присутствуют во рту или половых путях. Мужчины с половой кандидозной инфекцией, как правило, не имеют клинических проявлений.

Причины заболевания и факторы риска

Кандидозный вагинит – инфекция, связанная с факторами риска, которые приводят к нарушению нормальной флоры влагалища («хороших» бактерий) вследствие чего происходит быстрый рост грибковых дрожжей.

Факторы риска:

  • Нарушение нормальной микрофлоры половых органов
  • Длительный прием антибиотиков
  • Длительное применение местных антисептиков
  • Наличие урогенитальных половых инфекций
  • Использование презервативов, содержащих спермициды (ноноксинол-9)
  • Нарушение гормонального обмена — Длительный прием гормональных препаратов
  • Применение гормональной контрацепции
  • Беременность
  • Повышение уровня сахара в крови — Сахарный диабет и преддиабет
  • Злоупотребление продуктами, содержащими сахар
  • Вторичный иммунодефицит — ВИЧ-инфекция
  • Длительная терапия иммунодепрессантами
  • Хронические воспалительные заболевания
  • Злокачественные новообразования
  • Туберкулез
  • Радиоактивное облучение

Проявления болезни

Острый кандидозный вагинит проявляется ярко выраженной картиной, длительность заболевания острой формой не превышает 2 месяцев.

Проявления:

  • Обильные или умеренные творожистые выделения из влагалища;
  • Гиперемия, отек, высыпание на коже и слизистых оболочках вульвы и влагалища;
  • Зуд, жжение, раздражение в области наружных половых органов;
  • Усиление зуда во время сна или после водных процедур и полового акта;
  • Неприятный запах, усиливающийся после половых контактов.

Диагностика

Диагностика заболевания проводится на основании характерных жалоб больной, клинического осмотра и лабораторных исследований.

Лабораторная диагностика включает:

  • микроскопия (исследование мазка под микроскопом), мазок должен быть свежим, не более 2 часов от взятия. При правильном взятии и подготовке мазка чувствительность метода достигает 40 — 60%;
  • определение кислотности влагалищного содержимого;
  • бактериологический посев вагинального содержимого – наиболее чувствительный метод для подтверждения диагноза. Это очень важный тест, поскольку до 40% грибов не чувствительны к обычно назначаемым в женских консультациях антимикотикам;
  • ПЦР (полимеразная цепная реакция) – позволяет быстро определить возбудителя в мазке;
  • дополнительные исследования крови, консультации специалистов необходимы для выяснения причин кандидоза.

Лечение заболевания

Общие рекомендации:

  • соблюдение личной гигиены;
  • отказ от обтягивающего синтетического нижнего белья, замена его хлопковым;
  • во время месячных предпочтительнее использование гигиенических прокладок, чем тампонов.

Лечение проводится специальными противогрибковыми антибиотиками – антимикотиками – которые могут применяться местно или приниматься внутрь. Обязательным условием является определение чувствительности грибов рода Кандида к антимикотикам. Назначение «вслепую» флюконазола («Дифлюкан», Флюкостат») недопустимо.

Очень важно устранить предрасполагающие условия и факторы риска развития кандидоза, определить наличие сопутствующих заболеваний.

Контроль излеченности проводится спустя 7-10 дней после завершения лечения.

Профилактика

Наилучший путь профилактики инфекций, передаваемых половым путем – это долговременные половые контакты с одним здоровым половым партнером. Важно обсудить вопросыИППП с половым партнером до секса. Предотвращение инфекций возможно, если партнеры знают о заболеваниях и путях их распространения.

Мужские презервативы из латекса, при правильном применении снижают риск передачи инфекций.

Любые проявления, такие как боль или неприятные ощущения при мочеиспускании, необычная сыпь, выделения могут являться признаком ИППП. Это является сигналом для прекращения половых контактов и немедленного обследования в условиях специализированной клиники – КВД. Если у больного обнаружены ИППП, он должен сообщить об этом своим половым партнерам, для того чтобы они также прошли полное обследование и соответствующее лечение. Это снизит риск развития серьезных осложнений и предотвратит возможность повторного заражения.

Больные ИППП должны воздержаться от незащищенного секса во время лечения, в противном случае возможно повторное заражение полового партнера.

 

Кандидоз слизистой. Выделение чистой культуры и определение чувствительности к антимикотическим препаратам

Микробиологическое исследование, в ходе которого определяют наличие и видовую принадлежность дрожжеподобных грибов рода Candida, используемое для диагностики и контроля лечения кандидоза слизистых оболочек.

Синонимы английские

Кандидоз полости рта, генитальный кандидоз. Посев на среду с определением вида гриба и его резистентности к противогрибковым препаратам.

Метод исследования

Микробиологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из десневого кармана.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не проводить туалет полости рта в день взятия биоматериала на исследование.

Общая информация об исследовании

Кандидоз слизистой – это инфекционно-воспалительный процесс, вызываемый дрожжеподобными грибами рода Candida, на слизистых оболочках. Наибольшее клиническое значение имеет кандидоз полости рта и генитальный кандидоз.

Дрожжеподобные грибы рода Candida (Candida spp.) считаются представителями нормальной микробиоты слизистых организма человека. Действительно, дрожжевые грибы могут быть выявлены примерно у 60 % взрослых здоровых людей в полости рта и у 12 % женщин во влагалище. В норме дрожжевые грибы находятся в равновесии с бактериальными комменсалами слизистых оболочек и не вызывают никаких воспалительных изменений («здоровое носительство»). В некоторых ситуациях, однако, рост дрожжевых грибов усиливается, что сопровождается возникновением локального инфекционно-воспалительного процесса – кандидоза, который также известен под названием «молочница». Чаще всего причиной кандидоза слизистых является C. albicans, однако все большее значение приобретает кандидоз, вызванный другими видами этого рода – C. glabrata, C. dubliniensis, C. krusei и др.

Кандидоз слизистых встречается очень часто. Факторами риска кандидоза полости рта являются младенческий и пожилой возраст, наличие тяжелых заболеваний с иммунодефицитом (особенно лейкоз, лимфомы, карциноматоз и ВИЧ), недостаточная гигиена полости рта, синдром Шегрена, сахарный диабет и другие эндокринологические заболевания, ношение зубных протезов, применение ингаляционных и системных глюкокортикоидов. Факторы риска генитального кандидоза (вульвовагинита) менее ясны, однако предполагается значение нарушения баланса эстрогенов и применения антибиотиков.

Клиническая картина кандидоза слизистых достаточна характерна (наличие крошковатых налетов белого цвета на фоне гиперемии при псевдомембранозной форме кандидоза), однако она может напоминать другие заболевания, в первую очередь лейкоплакию и красный плоский лишай. Для дифференциальной диагностики этих заболеваний проводят лабораторные тесты.

Существует несколько способов идентификации дрожжеподобных грибов: микроскопия окрашенного по Граму или с помощью метиленового синего мазка/соскоба, микроскопия мазка/соскоба после обработки раствором гидроксида калия KOH, микроскопия нативного мазка (для вульвовагинита) и посев на среду (микробиологический метод).

Посев на среду – это самый точный метод диагностики. С помощью этого метода удается не только выявить дрожжеподобные грибы, но и определить конкретный вид гриба и его количество, а также его чувствительность к противогрибковым препаратам. Определение видовой принадлежности культуры микроорганизмов, в том числе грибов, называется выделением «чистой культуры». Выделение чистой культуры и определение чувствительности к противогрибковым препаратам имеет особое значение при наличии у пациента резистентного к стандартной (эмпирической) антимикотической терапии кандидоза или при рецидивирующем течении заболевания. Исследование может применяться как для первичной диагностики, так и для оценки эффективности лечения заболевания.

С учетом большой распространенности «здорового носительства» грибов рода Candida, у многих людей при микробиологическом исследовании может быть определен незначительный рост дрожжеподобных грибов. При отсутствии каких-либо клинических признаков  кандидоза такой рост не имеет никакого клинического значения. С другой стороны, обилие колоний дрожжевых грибов (более 104 КОЕ/мл) у пациента с минимальными признаками кандидоза или вовсе без них, но с факторами риска этого заболевания должно насторожить врача и, возможно, потребует назначение антимикотических препаратов. В этом случае дополнительным диагностическим исследованием, которое может существенно помочь при интерпретации результатов, является микроскопия — определение в мазке множества делящихся дрожжеподобных грибов свидетельствует в пользу кандидоза.

С учетом того, что иногда кандидоз слизистой (в первую очередь, полости рта) является симптомом более серьезного заболевания, в некоторых случаях могут быть рекомендованы дополнительные лабораторные тесты, в том числе анализ глюкозы крови, определение гормонов щитовидной, паращитовидной, половых желез и надпочечников, анализ на ВИЧ и иммунологические исследования. Более широкое лабораторное обследование также показано при наличии хронического кандидоза кожи и слизистых. Следует отметить, что генитальный кандидоз не относится к числу инфекций, передающихся половым путем (ИППП), поэтому при выявлении этого заболевания у пациента обследование его половых партнеров не показано.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики и контроля лечения кандидоза слизистых оболочек.


Когда назначается исследование?

  • При наличии признаков кандидоза слизистых оболочек: жжения, болезненности, зуда, наличия крошковатых налетов белого цвета на фоне гиперемии;
  • при наличии факторов риска кандидоза полости рта: младенческий и пожилой возраст, наличие тяжелых заболеваний с иммунодефицитом (лейкоз, лимфомы, карциноматоз и ВИЧ), недостаточная гигиена полости рта, синдром Шегрена, сахарный диабет и другие эндокринологические заболевания, ношение зубных протезов, применение ингаляционных и системных глюкокортикоидов.

Что означают результаты?

Выдается результат по грибам рода Candida — обнаружены/не обнаружены + результат по микроскопии (наличие нормальной микрофлоры/ клетки эпителия, лейкоциты, палочки, кокки и т.д.).

Положительный результат:

  • кандидоз слизистых;
  • «здоровое носительство».

Отрицательный результат:

  • норма;
  • эффективное лечение противогрибковыми препаратами.

Что может влиять на результат?

  • Применение противогрибковых препаратов (флуконазол, итраконазол) может приводить к ложноотрицательному результату.
 Скачать пример результата

Важные замечания

  • При отсутствии каких-либо клинических признаков кандидоза незначительный рост колоний гриба (менее 104 КОЕ/мл) не имеет клинического значения;
  • иногда кандидоз слизистой (в первую очередь, полости рта) является симптомом более серьезного заболевания, поэтому могут быть рекомендованы дополнительные лабораторные тесты.

Также рекомендуется

[02-014] Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)

[06-015] Глюкоза в плазме

[08-118] Тиреотропный гормон (ТТГ)

[08-033] Паратиреоидный гормон, интактный

[07-032] HIV 1,2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)

Кто назначает исследование?

Терапевт, дерматовенеролог, врач общей практики.

Литература

  1. Gonsalves WC, Chi AC, Neville BW. Common oral lesions: Part I. Superficial mucosal lesions. Am Fam Physician. 2007 Feb 15;75(4):501-7.
  2. Burns T., Breathnach S., Cox N., Griffiths C. Rook’s Texbook of Dermatology / T. Burns, S. Breathnach , N. Cox, C. Griffiths; 8th ed. – Wiley-Blackwell, 2010.

Кандиды Candida albicans,Candida glabrata, Candida crusei — генотипирование

Грибы рода Candida (кандида) вызывают поверхностный, инвазивный и другие формы кандидоза. Род Candida насчитывает более 130 видов.

Наиболее часто возбудителем кандидоза у человека является вид Кандида албиканс, реже встречаются Кандида тропикалис, Кандида крузей и др.

У большинства здоровых людей в организме присутствуют грибы рода Кандида. Но не у каждого человека развивается кандидоз – грибковое поражение кожи и слизистых. Наибольшее количество дрожжей в организме человека содержится в кишечнике. В кишечнике человека развитие дрожжевых грибов постоянно сдерживается нормальной микрофлорой кишечника. При дисбактериозе кишечника грибы начинают бурно размножаться и распространяться. При кишечном дисбактериозе как рпавило наблюдается и  нарушение работы иммунной системы, что тоже способствует развитию кандидоза.

 

Факторы, провоцирующие развитие кандидоза кожи  и слизистых:

• снижение иммунитета (простуда, сахарный диабет, ВИЧ-инфекция)

• прием антибиотиков широкого спектра действия

• прием препаратов, угнетающих иммунитет (например, кортикостероидов)

• длительное пребывание пальцев в воде, травмы ногтей и кожицы при маникюре

 

В большинстве случаев кандидоз развивается на поверхностных участках кожи и слизистых, и лишь у людей с выраженным дефицитом иммунитета возможно развитие кандидоза внутренних органов.

 

Диагностика кандидоза кожи и слизистых оболочек основана на выявлении грибов рода Кандида в материале, полученном при соскобе кожи и слизистых. При кандидозе кожи и ногтей производят микроскопию (изучение под микроскопом) соскобов с поврежденных участков кожи. Другим достоверным методом обнаружения грибов рода Кандида является культуральный метод – выращивание полученных из соскобов микроорганизмов на питательных средах и их последующее изучение. Кандидоз пищевода и желудка выявляют с помощью ФЭГДС (фиброэзофагогастродуоденоскопии). Кандидоз кишечника выявляют при посеве кала больного на питательные среды.

Кандидоз пищеварительной системы, профилактика и лечение кандидоза ЖКТ

Кандидоз, или поражение дрожжеподобными грибками типа Candida и других, поражает кожные покровы и слизистые оболочки. Как правило, проявление болезни происходит на видимых кожных покровах и слизистых, а в случае несвоевременной диагностики и запущенности, возможно заражение желудочно-кишечного тракта и других внутренних органов.

Следует также отметить, что грибковые микроорганизмы присутствуют в теле человека всегда, и к заболеваниям ведет лишь изменение их количества — как правило, резкого возрастания. Хотя фото образований, вызванных грибками, выглядят достаточно удручающе.

Кандидоз: общие причины и симптоматика

Как заболевание, вызванное грибком, кандидоз может проявиться в ряде случаев:

  • Бесконтрольный длительный прием специфических препаратов и медикаментов вроде антибиотиков, способствующих размножению патогенной микрофлоры, к которой относятся и грибки Candida.
  • Снижение иммунитета (сезонное или вызванное недостатком витаминов).
  • Заболевания хронического характера — щитовидной железы, дыхательной системы, почек, нарушение обмена веществ (сахарный диабет).
  • Прием гормональных и глюкокортикостероидных препаратов.
  • Употребление в пищу немытых фруктов, ягод, зараженных грибком.

Поражение ЖКТ может проявляться в:

  • Эзофагите, или поражении кандидами пищевода, которое выглядит как белые пятна и налеты в нижней трети и средней части. При анализе очагов выявляют элементы гриба.
  • Кандидозном гастрите (заражении желудка)
  • Кандидозном энтероколите (кишечном поражении).

Также кандидоз ЖКТ при несоблюдении правил гигиены или их нарушении может перекинуться и на другие органы, в особенности — мочеполовую систему. Отсюда — риск появления кандидомикоза (кандиды в складках слизистой и кожных покровов), молочницы у женщин и т.д.

Как себя может проявить кандидоз в желудочно-кишечном тракте?

Среди частых симптомов, сопровождающих грибковое поражение слизистых оболочек пищеварительной системы, можно выделить:

  • Отечность во рту, гортани, возможное жжение, сухость в глотке, кашель.
  • Затрудненное глотание, неприятный привкус.
  • Возможность повышения температуры, озноб, рвота.
  • Появление на видимых слизистых белого налета или красных пятен.
  • Наличие в рвотных массах частиц крови и слизистой пленки
  • При запущенности заболевания — примеси крови в жидком стуле.
  • Общее недомогание, слабость, потеря аппетита.

Опасность заболевания заключается в том, что долгое время болезнь может себя не проявлять, хотя на внутренних стенках органов могут происходить значительные и необратимые процессы.

При малейшем дискомфорте или проявлении тревожных симптомов следует обратиться к профильным специалистам в Мариуполе, что позволит вовремя диагностировать болезнь и назначить правильное лечение.

Кандидоз: диагностика ЖКТ

Перед тем, как направить пациента на лабораторные исследования, гастроэнтеролог может сделать предварительное заключение, опираясь на результаты ультразвукового исследования. Часто симптомы кандидоза ЖКТ дают картину, похожую на гастрит, дисбактериоз или другое воспаление. Ясность внести может только комплексное обследование.

Непосредственно грибковая болезнь диагностируется через:

  • Анализ рвотных и каловых масс на присутствие грибка.
  • ФЭГДС, способное показать наличие очагов воспаления, с которых также берутся частицы для детального анализа под микроскопом.
  • При жалобах пациента на затруднение в глотании и неприятные ощущения во рту проводится первоначальный внешний осмотр, который также помогает выявить видимые воспаления.

Профилактика и лечение кандидоза ЖКТ в Мариуполе

Вовремя выявленное грибковое поражение любого органа позволяет предотвратить распространение инфекции на другие органы и системы организма. Как правило, при обращении пациента, алгоритм действий врача следующий:

  • Внешний осмотр, опрос пациента касательно симптомов.
  • Выбор методов обследования и проведение анализов.
  • Назначение индивидуальной противогрибковой терапии, а также соответствующего режима и диеты.

В качестве профилактики пациентам может быть рекомендован витаминный курс, пробиотики, акцент на соблюдении норм личной гигиены.

Процедура прямой микроскопии в кресле для диагностики кандидоза полости рта у подростков

Кандидоз полости рта вызывается грибами рода Candida и является одной из наиболее распространенных оппортунистических грибковых инфекций полости рта человека. Учитывая клиническую изменчивость этого заболевания, часто требуются микробиологические методы для клинического подтверждения, а также для установления дифференциального диагноза с другими заболеваниями. Цель этого краткого технического отчета — проиллюстрировать простой метод в кресле, который может обеспечить немедленную микроскопическую диагностику этого заболевания.Мы представляем случай 14-летнего мальчика, страдающего эритематозным стоматитом, связанным с протезированием, который был диагностирован и обследован с помощью упрощенной методики прямой микроскопии. Это позволяет поставить точный диагноз с помощью неинвазивного и безболезненного метода отбора проб, связанного с лабораторными результатами.

1. Введение

Кандидоз полости рта вызывается грибами рода Candida и является одной из наиболее распространенных условно-патогенных грибковых инфекций полости рта человека. В полости рта выделено 150 видов этого рода, 80% из которых соответствуют Candida albicans [1]. Инфекция орального кандидоза может быть острой или хронической и классифицироваться как псевдомембранозная или эритематозная. Кандидоз полости рта — одно из наиболее частых заболеваний слизистых оболочек, так как встречаются все типы инфекций [2]. Повышенная частота инфекций может быть связана с различными предрасполагающими факторами, такими как длительная терапия антибиотиками, недоедание, эндокринные расстройства, ВИЧ-инфекция, ксеростомия, курение, плохая гигиена полости рта и использование протезов [3]. Обычно диагноз кандидоза полости рта ставится на основании клинических симптомов [4] и обычно не вызывает затруднений в случаях острого псевдомембранозного кандидоза, особенно у младенцев.Однако, учитывая клиническую изменчивость этого заболевания, часто требуются микробиологические методы для клинического подтверждения, а также для установления дифференциального диагноза с другими заболеваниями. Кроме того, в случаях, характеризующихся устойчивостью к противогрибковым препаратам, особенно у хронических пациентов, может быть полезен дополнительный микробиологический тест. В настоящее время используется несколько методов для выделения и идентификации видов Candida , включая прямую микроскопию мазков, окрашиваний, культур и генетические методы (ПЦР) [5].Также тестируются новые методы идентификации, чтобы обеспечить быстрое и точное обнаружение [6]. Недавний обзор литературы продемонстрировал преимущества прямой микроскопии в диагностике кандидоза полости рта у детей и подростков [7]. Цель этого краткого технического отчета — проиллюстрировать простой метод в кресле, который может обеспечить немедленную микроскопическую диагностику этого заболевания.

2. История болезни

Чтобы проиллюстрировать этот метод, мы представляем случай 14-летнего мальчика, страдающего эритематозным стоматитом, связанным с протезированием (рис. 1).Стоматит, связанный с протезированием, определяется как воспалительный процесс слизистой оболочки полости рта, лежащей в основе съемного зубного протеза. У молодых пациентов стоматит, связанный с протезированием, может быть следствием осложнения детского протезного протеза или может возникнуть во время длительного ортодонтического лечения съемным материалом. Данная патология описана как у детей, так и у подростков, предложены методы диагностики и лечения [8–11]. Здесь в течение двух лет носили съемный ортодонтический аппарат, чтобы компенсировать агенезию зубов.


Классическая микроскопическая процедура обычно включает в себя удаление репрезентативного образца с инфицированного участка (эксфолиативная цитология), который переносится на предметное стекло и обрабатывается гидроксидом калия (КОН), красителем по Граму или периодической кислотой-Шиффом (PAS). . Был проведен сбор образцов, который был отправлен в лабораторию для культивирования, и результат был положительным для Candida albicans .

Затем мы предоставили для сравнения упрощенный метод прямой микроскопии.В этом методе слюна пациента собиралась на дне рта. Внутриротовое зеркало помещали под язык горизонтально, контактируя со слизистой оболочкой. Когда слюна покрывает зеркало, ее вынимают изо рта и кладут на предметное стекло (рис. 2 (а)). Затем образец был собран с помощью стерильного зонда, непосредственно помещенного в слюну пациента (рис. 2 (c)), и было закреплено покровное стекло. Важно отметить, что область борозды является оптимальным местом для взятия пробы с помощью этого метода (рис. 2 (b)).Практикующий должен надавить пальцем на предметное стекло, чтобы распределить образец. Затем образец анализировали под фазово-контрастным оптическим микроскопом (рис. 2 (d)). Наиболее интересным является увеличение × 1000, поскольку оно позволяет отличать непатогенные формы дрожжей от условно-патогенных форм гиф. В патологических условиях на каждом экране видны несколько гиф, смешанных с бактериями и клетками полости рта (рис. 3). Важно отметить, что этот метод ценен для определения эффективности лечения.Курс лечения включал 3 недели местного лечения противогрибковым препаратом (амфотерицин В) и замену протеза на фиксированный. Другой лабораторный анализ по культивированию был отрицательным. При двухлетнем наблюдении та же процедура показала нормализацию флоры полости рта при отсутствии гиф (рис. 4 (b)), что связано с клиническим улучшением (рис. 4 (а)).


3. Заключение

Прямая микроскопия широко используется в лабораториях для диагностики кандидоза.Он позволяет поставить точный диагноз с помощью неинвазивного и безболезненного метода отбора проб, особенно хорошо подходит для молодых пациентов. Классическая процедура, которая включает сбор образцов и отправку в лабораторию, требует больше времени и затрат. Более того, представленный здесь метод не требует фиксации или обработки образцов. Следовательно, это экономичный способ изучить микробиоту полости рта пациента и определить любой потенциальный дисбаланс. Хотя прямая микроскопия не так специфична, как посев, она, по-видимому, является предпочтительной процедурой для диагностики первой линии.Конечно, абсолютно необходимо полное клиническое обследование, а также обширный анамнез для изучения любого связанного с ним общего заболевания. Более того, этот подход требует опыта в обнаружении дрожжей с помощью микроскопических наблюдений, что не входит в компетенцию клиницистов. Однако идентификация не очень сложна, и простого кратковременного формирования может быть достаточно. Таким образом, все больше практикующих получат доступ к этому методу; следовательно, дальнейшее ознакомление с этим простым микроскопическим анализом позволит клиницистам сразу поставить диагноз прямо в кресле.Более того, как и в случае с внутриротовыми камерами, учитывая прогресс микроскопических устройств, они могут быть интегрированы в концепцию ухода, ориентированного на человека, как элемент обучения и профилактики, позволяющий понимать диагнозы и принимать обоснованные решения о лечении [12]. Возможное развитие микроскопов для смартфонов упростит доступ врачей к микроскопии. Микроскопы на базе смартфонов уже используются для обнаружения паразитов [13] или получения изображений живых клеток [14]. Это многообещающий подход для выполнения точной диагностики в кресле в будущем.

Этическое одобрение

Все процедуры, выполненные в исследовании с участием людей, соответствовали этическим стандартам Тулузского университета и Хельсинкской декларации 1964 года с поправками к ней.

Согласие

Информированное согласие было получено от всех пациентов и их родителей. Все авторы дали согласие на публикацию.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Авторское право

Авторское право © 2018 Mathieu Lemaitre et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая по лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Дрожжи — UNC Lineberger

Дрожжи в культуре клеток суспензионного типа при увеличении 100x

Описание: Если вы когда-нибудь пробовали по-настоящему хороший хлеб и холодное пиво (хорошее только в этой комбинации, когда в холодильнике ничего другого нет), вы согласитесь, что в целом дрожжи — друг человека.Дрожжи используются для сбраживания сахаров различных зерен для производства алкогольных напитков и в хлебопекарной промышленности для вспучивания теста. Но в мире культуры клеток млекопитающих дрожжи — нежеланный гость. Дрожжи являются настоящими грибами типа Ascomycetes Hemiascomycetes . У дрожжей есть множество естественных сред обитания, включая листья и цветы растений, почву и воду, где они помогают разлагать растения и водоросли, а также они встречаются на поверхности кожи и в пищеварительном тракте млекопитающих.Они размножаются как одиночные клетки, которые делятся почкованием или прямым делением и могут быстро расти (время удвоения менее 12 часов в некоторых случаях) в зараженных культурах клеток.

Характеристики культур клеток млекопитающих: На ранних стадиях контаминации дрожжи обычно не вызывают изменений pH в среде. Однако по мере увеличения инфицирования среда для культивирования клеток станет мутной для невооруженного глаза, а pH может стать основным. При 100-кратном увеличении дрожжи выглядят как отдельные круглые или яйцевидные частицы или цепочки из двух-четырех или более частиц, а иногда могут быть разветвленными. Появление цепочек связано с наиболее распространенной формой репликации, называемой почкованием. Дрожжи легко отличить от бактерий по размеру. Дрожжи больше, чем бактерии, и меньше, чем типичные клетки млекопитающих (см. Пример выше).

Типичные пути заражения в культурах: Первоначальное заражение дрожжами в культуре клеток, как правило, происходит воздушно-капельным путем, но дрожжи могут легко «колонизировать» инкубатор, а затем могут распространяться на другие культуры при контакте с загрязненными поверхностями колбы или чашки во время культивирования клеток. манипуляции.Дрожжи, вероятно, наиболее легко поддаются «лечению» из распространенных загрязнителей культур клеток. Свяжитесь с персоналом TCF для получения рекомендаций и протоколов.

Антибиотики: Двумя наиболее распространенными антимикотическими средствами, эффективными против дрожжей в культуре клеток, являются амфотерицин B (фунгизон) и микостатин (нистатин). Важное примечание: обычно используемые антибиотики, такие как пенициллин / стрептомицин (pen / strep), гентамицин и канамицин, НЕ эффективны против дрожжей. Фунгизон можно использовать в средах при конечных рабочих концентрациях от 0.25 мкг / мл и 2,5 мкг / мл. Фунгизон обычно очень токсичен для систем клеточных культур, и его следует использовать консервативно. Нистатин можно использовать в конечных рабочих концентрациях от 100 Ед / мл до 250 Ед / мл. Нистатин представляет собой коллоидную суспензию, а не раствор, и его следует тщательно перемешать перед добавлением в среду для культивирования клеток. Когда нистатин находится в среде и рассматривается под микроскопом, он выглядит как маленькие кристаллические частицы. Очень полезный список антибиотиков, микроорганизмов, против которых они эффективны, и рекомендуемые рабочие концентрации, составленный компанией Sigma-Aldrich, можно найти в виде документа в формате pdf (129 КБ, 3 страницы), щелкнув следующую ссылку.Файл будет загружен, и его можно будет открыть с помощью Adobe Acrobat Reader. Список антибиотиков

дрожжевых клеток под микроскопом — характеристики, среда обитания, наблюдение

Характеристики, среда обитания и наблюдение


Что такое дрожжи?

Дрожжевые клетки являются членами Королевства грибов. Они есть одноклеточные микроорганизмы (эукариотические), относящиеся к типу Ascomycota (мешочные грибы) и Basidiomyota (высшие грибы), оба из которых подпадают под субцарствие Дикария.


Дрожжевые клетки
  • Kingdom — Fungus
  • Sub Kingdom — Kikarya
  • Phyla — Ascomycota and Basidiomycota

* Бутовые дрожжи, также называемые настоящими дрожжами подпадают под тип Acomycota и в отряд Saccharomycetales

Дрожжи очень разнообразны (более 1500 видов) с большинство из них образуют тип Ascomycota, в то время как лишь некоторые из них классифицируются как Basidiomycota. Дрожжевые клетки размножаются посредством почкования или двойного деления, которые являются методы бесполого размножения (Хорст, 2010).

Почкование — Новая дрожжевая клетка образуется в результате деления митотических клеток и остается прикрепляется в виде почки к старой клетке, пока она не расщепится и не станет независимой. Здесь родительская клетка производит отросток, который в конце концов расщепляется, чтобы стать независимая идентичная ячейка как родительская ячейка.

Бинарное деление — При бинарном делении рост (зачаток) отсутствует. сформирован. Скорее, посредством митоза геном реплицируется и делится, за чем следует образование новой плазматической мембраны и, в конечном итоге, деление клетки на два, чтобы сформировать две новые ячейки из родительской ячейки.


* Некоторые из грибов, называемых диморфными, имеют тенденцию чередовать дрожжевую и гифальную фазу, что означает, что они также могут растут как гифы (нитевидные)


Среда обитания

Поскольку они очень разнообразны, дрожжи могут быть встречаются в самых разных средах обитания, особенно в средах с богатые сахаром материалы. Их можно найти на цветах, листьях растений и фрукты, а также на почве, в глубоководных средах, на поверхности кожи и даже кишечные тракты животных (теплокровные).

Хотя их можно найти во многих среды, дрожжи требуют влажной среды с достаточным количеством простых и растворимые питательные вещества для поддержки роста и размножения (Horst, 2010).

Хотя такие дрожжи, как Candica, могут вызывать Инфекции (кандидоз) полезны такие дрожжи, как:

  • Пекарские дрожжи
  • Пищевые дрожжи
  • Пивные дрожжи
  • Дистилляторные и винные дрожжи


Дрожжи под микроскопом

Требования к воде 9109

  • Дрожжевой пирог
  • Капельница
  • Стеклянные слайды и крышка листы
  • Пятна (указаны ниже)
  • Дрожжевой пирог содержит Saccharomyces Cerevisiae (гриб, поедающий сахар), и поэтому его можно использовать для получения дрожжей для наблюдения под микроскопом. Ниже приводится процедура, которую можно использовать для подготовки образец для наблюдения.

    • Получить дрожжевой жмых (эта банка купить в специализированных магазинах хлебобулочных изделий или в супермаркете)
    • Нарежьте небольшой кусочек дрожжей торт и смешайте с водой до образования пастообразной консистенции
    • Добавьте немного воды в сформировать раствор
    • С помощью пипетки собрать и поместите каплю раствора на предметное стекло микроскопа
    • Поместите крышку микроскопа поскользнуться и наблюдать под мощным объективом


    Наблюдение

    При осмотре образца под высоким при увеличении (1000х и выше) можно увидеть овальный (яйцевидный) организм, который дрожжи. Также можно наблюдать бутоны, которые можно увидеть на часть дрожжевых клеток.

    Если в растворе было немного сахара, обратите внимание на пузырьки в образце, возникшие в результате ферментации процесс микроорганизмами.

    Флуоресцентная микроскопия может использоваться для цели наблюдения органелл внутри дрожжевых клеток. Это особенно отличный метод, с помощью которого студенты могут увидеть внутриклеточные распределение клетки и выявить различные типы клеточных органелл.

    Это может оказаться немного сложным, когда дело доходит до дрожжей, учитывая, что они очень маленькие по размеру (по сравнению с другими клетками) и имеют клеточную стенку (Чалфи и Каин, 2005).

    Для живых дрожжевых клеток необходимо количество красителей. использоваться для увеличения контраста и возможности различать различные органеллы в клетках.

    Сюда входят:

    Дрожжи — одни из самых маленьких эукариотических клеток. диаметром от 5 до 10 мкм. По этой причине важно рассматривать их под большим увеличением. с помощью флуоресцентной микроскопии.

    Здесь, объективы 60x или 100x с числовым диафрагма 1,4 рекомендуется для визуального наблюдения и максимальной яркости и разрешение соответственно.

    При записи с помощью цифровой камеры (например, с помощью 6,8 x 6,8 мкм), то рекомендуется 60-кратное увеличение с числовая апертура 1,4 (Hašek, 2006).


    См. Также:

    Микология в целом как область исследования

    Грибы — типы, морфология и структура, использование и недостатки

    Дальнейший взгляд на плесень под микроскопом.

    Возвращение из дрожжей под микроскопом в эксперименты с микроскопом

    Возвращение в MicroscopeMaster Home


    Источники

    Мартин Чалфи и Стивен Р. Кейн (2005) Грин Флуоресцентный белок: свойства, применение и протоколы.

    Иржи Хашек (2006) Флуоресцентная микроскопия дрожжей. Том 313 из серии «Методы молекулярной биологии», стр. 85-96.

    Фельдманн, Хорст (2010). Дрожжи. Молекулярный и Клеточная биография.

    Дрожжевая инфекция на лице: причины, симптомы и лечение

    Мы включаем продукты, которые, по нашему мнению, будут полезны нашим читателям.Если вы покупаете по ссылкам на этой странице, мы можем получить небольшую комиссию. Вот наш процесс.

    Пятна или сыпь на лице могут вызывать дискомфорт и вызывать беспокойство. Если вы думаете, что сыпь на лице может быть вызвана дрожжевой инфекцией, хорошая новость в том, что ваше состояние поддается лечению.

    Как домашние средства, так и рецепты помогут вылечить дрожжевую инфекцию на вашем лице. Обязательно проконсультируйтесь с врачом для диагностики, прежде чем лечить дома.

    Грибковая инфекция вызвана дисбалансом Candida albicans , типа грибка, который обычно обитает на влажных участках вашего тела, таких как гениталии, рот и кожа. Это называется дрожжевой инфекцией, потому что Candida — это тип дрожжей. Дрожжевые инфекции на коже называются кожным кандидозом.

    Дрожжевые инфекции на вашем лице вызваны чрезмерным ростом Candida в вашем теле. В большинстве случаев грибковая инфекция на лице сопровождается дрожжевой инфекцией по всему телу. Однако местные дрожжевые инфекции могут возникать, когда дисбаланс затрагивает только одну часть вашего тела, включая лицо.

    Распространенные причины дисбаланса дрожжевых грибков на лице:

    Дрожжевые инфекции обычно проявляются в виде красной кожной сыпи.Эта сыпь иногда может появляться в виде шишек или пустул. Если сыпь расположена в центре вокруг рта, у вас может быть заболевание, называемое оральным молочницей, которое представляет собой грибковую инфекцию полости рта.

    Сыпь также может сопровождаться следующим:

    Дрожжевую инфекцию врач может эффективно диагностировать с помощью дрожжевого теста. Дрожжевой тест проводится путем соскабливания кожных покровов с сыпи. Затем они посмотрят на клетки под микроскопом. Если они не могут определить причину вашей сыпи, они закажут тест на культуру, который может занять несколько дней или недель.

    Вы всегда должны быть осторожны при лечении высыпаний на лице или кожных заболеваний, так как кожа на вашем лице чувствительная. Вы можете испытывать реакцию на лекарства или процедуры, которые наносите на лицо, даже если у вас нет реакции на другие части тела.

    Обычные методы лечения дрожжевых инфекций включают:

    • противогрибковый крем, часто с клотримазолом в качестве активного ингредиента
    • противогрибковый лосьон, часто с толнафтатом в качестве активного ингредиента
    • противогрибковые препараты для перорального применения, часто с флуконазолом в качестве активного ингредиента
    • кортикостероид крем, такой как гидрокортизон

    Обязательно используйте стероидные кремы в сочетании с противогрибковыми, а не только, для лечения дрожжевой инфекции.

    Предотвратить дрожжевую инфекцию в будущем можно так же просто, как улучшить режим ухода за лицом. Если ваша дрожжевая инфекция совпала с использованием нового средства для лица, вам следует прекратить его использование в целях безопасности.

    Если вы предпочитаете лечить дрожжевую инфекцию дома, существует ряд натуральных домашних средств, которые могут облегчить вам симптомы.

    1. Кокосовое масло. Кокосовое масло обладает многими лечебными свойствами и, как известно, помогает при различных состояниях кожи.Это также увлажнит вашу кожу.
    2. Масло чайного дерева. Масло чайного дерева можно наносить прямо на лицо или добавлять в лосьон для облегчения борьбы с грибковой инфекцией на лице.
    3. Оливковое масло, озонированное. Оливковое масло обладает противогрибковыми свойствами, которые могут успокоить дрожжевую инфекцию, а также разглаживать кожу.

    Купите кокосовое масло, масло чайного дерева и озонированное оливковое масло в Интернете.

    Дрожжевые инфекции на лице легко поддаются лечению в домашних условиях или с помощью рецептурных противогрибковых препаратов. Противогрибковые препараты, отпускаемые без рецепта, также помогают избавиться от дрожжевых инфекций на лице и коже.

    Обязательно проконсультируйтесь со своим врачом, если ваша дрожжевая инфекция усиливается, распространяется или вызывает сильный дискомфорт.

    Познакомьтесь с пекарскими дрожжами, распускающимся одноклеточным грибком, который взбивает ваш хлеб — UB Now: новости и обзоры для преподавателей и сотрудников UB

    Research News

    Поднимается тесто в замедленной 100-минутной анимации. В хлебном тесте пекарские дрожжи или Saccharomyces cerevisiae переваривают сахар и выделяют углекислый газ.CO2 образует пузырьки в тесте и заставляет его расширяться. Фото: Дуглас Левере

    Автор CHARLOTTE HSU

    Они живут в хлебном тесте. Они умирают в вашей духовке.

    В продуктовом магазине, где вы их покупаете, они сидят в маленьких стеклянных банках, бездействуя на полке, ожидая регидратации, чтобы они могли выполнять свою жизненную работу, поедая сахар и выделяя углекислый газ, чтобы образовывать пузырьки в вашем хлебе.

    Пекарские дрожжи стали популярным продуктом пандемии, поскольку люди пекут дома.

    Но что вы действительно знаете об этом организме, одноклеточном грибке, который ученые называют Saccharomyces cerevisiae ?

    Как оказалось, пекарские дрожжи — это распространенный модельный организм, который исследователи используют для изучения биологических процессов, включая болезни. Ряд биологов из Колледжа искусств и наук регулярно выращивают эти виды в своих лабораториях, а некоторые нашли время, чтобы обсудить дурацкую, замечательную науку о S. cerevisiae .

    Что такое пекарские дрожжи?

    «Дрожжи — это гриб, который растет как отдельная клетка, а не как гриб», — говорит Лаура Руш, доцент биологических наук.

    Хотя каждый дрожжевой организм состоит только из одной клетки, дрожжевые клетки живут вместе в многоклеточных колониях. Они размножаются посредством процесса, называемого почкованием, при котором у «материнской клетки» вырастает выступ, известный как «почка», который становится все больше и больше, пока не станет того же размера, что и мама.

    «Это дочерняя клетка, и она отщепляется», — говорит Сара Уокер, доцент биологических наук. «Это одноклеточные организмы, поэтому они не вырастают до грибов или чего-то подобного.

    Когда запасы пищи заканчиваются или окружающая среда становится суровой, S. cerevisiae может производить особые стрессоустойчивые клетки, называемые спорами, которые могут оставаться в состоянии покоя в течение длительных периодов времени, прорастая при улучшении условий. Обычные неспоровые дрожжевые клетки также можно сохранить путем замораживания.

    «Дрожжевые клетки могут сидеть на корточках и ждать — они могут впадать в своего рода анабиоз, чтобы пережить стресс», — говорит Уокер. «Мы не можем этого сделать, но они могут. В лаборатории мы помещаем их в морозильную камеру -80 по Цельсию, так что это глубокая заморозка, и они остаются стабильными в течение многих лет.Позже мы извлекаем немного льда из замороженной культуры, и она снова начинает расти ».

    Что дрожжи делают в природе?

    Пекарские дрожжи, или Saccharomyces cerevisiae , вид под микроскопом в лаборатории биолога из UB Лауры Руше. Каждый круглый объект представляет собой отдельную дрожжевую клетку. По словам Руше, изображенные клетки представляют собой лабораторный штамм S. cerevisiae , но дикие дрожжи выглядят практически так же. Фото: Эшли Ханнер

    Во всем мире дрожжи повсюду — на соке деревьев, на кожуре винограда, на опавших плодах.Организмы управляют процессом разложения, помогая расщеплять растительный материал.

    «Где в природе встречаются дрожжи? Его можно найти повсюду », — говорит Руше. «Он производит маленькие споры, и эти споры вроде как просто вокруг. Где он размножается, так это на гниющих растительных веществах, гниющих фруктах. Он любит сахар ».

    «Долгое время люди объединяли растения и грибы в одну кучу, но они биологически разные», — добавляет она. «Растения фотосинтезируют. Грибы — нет. Грибы живут за счет разлагающегося материала, таких как гниющая древесина, и они поедают то, что оставили после себя другие организмы, в то время как растения сами производят пищу посредством фотосинтеза.

    Уокер объясняет, что S. cerevisiae и другие виды дрожжей едят сахар и производят побочные продукты, включая углекислый газ (ответственный за воздушные карманы в квасном хлебе) и алкоголь (например, вино и пиво).

    «Дрожжи эволюционировали, чтобы использовать растительный материал с высоким содержанием сахара, который появился, когда появились цветущие растения», — говорит она. «Растения производят сладкие плоды, чтобы привлечь животных, чтобы они могли перемещать свои семена, но фрукты в основном падают на землю и гниют, и дрожжи используют все это в своих интересах.Они то, что гниют.

    Почему ученые используют пекарские дрожжи в лаборатории?

    Колонии пекарских дрожжей, или Saccharomyces cerevisiae , изображенные под микроскопом. В хлебном тесте дрожжи не растут: изображения взяты из исследования, проведенного в 2016 году в лаборатории биолога UB Пола Каллена, в ходе которого изучались клеточные механизмы, вызывающие определенные изменения в структуре роста дрожжей. В условиях, богатых глюкозой, на плоской лабораторной пластине (слева) дрожжевые клетки растут плотным скоплением.Но когда уровень глюкозы ограничен (справа), новые клетки растут наружу, образуя нити-подобную конфигурацию, которая может помочь в поисках пищи. Фото: Пол Дж. Каллен

    Исследователи используют пекарские дрожжи для изучения различных биологических процессов.

    Лаборатория Руша использует S. cerevisiae , чтобы узнать больше о том, как определенные гены включаются или выключаются в ответ на стресс. Команда Уокера использует этот организм для исследования тонкостей трансляции мРНК, которая заставляет клетки производить белки.

    Это исследование проливает свет на основную биологию S. cerevisiae . Но эта работа также может улучшить понимание клеточных процессов у других видов, от болезнетворных дрожжей до людей.

    Ученым нравится работать с пекарскими дрожжами, потому что они дешевы, их генетический материал легко поддается манипуляциям, и исследователи уже много о нем знают. Дрожжи тоже быстро растут.

    «Дрожжевые клетки — хороший модельный организм, потому что вы можете вырастить культуру за ночь.Время удвоения составляет всего полтора часа, тогда как если вы выращиваете культуру клеток млекопитающих, это может занять несколько недель », — говорит Уолкер. «В большинстве случаев дрожжи обладают урезанной версией генетического механизма, необходимого для аналогичных процессов у высших организмов. Поэтому иногда мы делаем нашу первоначальную работу с дрожжами, а затем пытаемся продолжить многообещающие результаты на клетках млекопитающих ».

    «Это действительно хорошо зарекомендовавший себя лабораторный организм, поэтому, если вы узнаете что-то новое о Saccharomyces , вы можете поместить это в контекст всего остального, что все сообщество уже узнало об этом организме.Вы можете соотнести данные с тем, что вам уже известно », — говорит Руше. «Если вы перейдете к виду, который еще не изучен, и сделаете открытие, вы получите отдельную информацию».

    Есть какие-нибудь советы пекарям и пивоварам?

    Пекарские дрожжи, Saccharomyces cerevisiae , расстойка с сахаром и водой в 40-минутной покадровой анимации. Фото: Дуглас Левере

    Кристофер Руперт, кандидат наук в лаборатории Руша, говорит, что одна из замечательных особенностей дрожжей заключается в том, что эти организмы эволюционировали не для того, чтобы помогать людям производить хлеб и пиво, а для выживания в своих экологических нишах.

    «У многих дрожжи ассоциируются с пивом и хлебом. Дрожжевые ферменты — они поглощают сахар и выделяют алкоголь и CO2 — и именно поэтому мы их так любим », — говорит он. «Но что интересно, так это то, что существует гипотеза, согласно которой дрожжи эволюционировали как способ борьбы с другими микроорганизмами. У дрожжей более высокая толерантность к алкоголю, поэтому, когда они выделяют алкоголь, они убивают бактерии вокруг себя, поэтому они остаются единственными ».

    В диссертации Руперта рассматриваются дрожжевые грибки Candida parapsilosis , которые могут вызывать инфекции у человека.Но он изучал S. cerevisiae в бакалавриате и также использует его дома — он заядлый пекарь, делает булочки для обеда, булочки для гамбургеров, пахту и хлеб на закваске. Он засеял свой хлеб пекарскими дрожжами, но он также содержит дикие дрожжи разных видов.

    «Когда мы приходили в лабораторию, он приносил нам образцы, — говорит Руш, вспоминая дни до социального дистанцирования. «Мы всегда получали все его угощения».

    Поскольку дрожжи не развивались специально для того, чтобы помогать людям, люди должны удовлетворять потребности дрожжей.

    Например, S. cerevisiae хорошо растет при температуре около 85 градусов по Фаренгейту, поэтому опытные пекари часто хранят поднимающееся тесто в тепле. Слишком холодно, и дрожжи будут медленно расти. Слишком жарко, и он умрет.

    Когда дело доходит до изготовления вина, выбор правильных видов дрожжей может быть важным, поскольку некоторые из них могут переносить более высокие уровни алкоголя, чем другие. Если дрожжи умирают до того, как они успевают поглотить весь сахар, ваш напиток может оказаться слишком сладким, — говорит Уокер, у которой во дворе растет персиковое дерево, и она делает персиковое вино.

    «Если вы печете или варите на дрожжах, у вас есть живой организм. Вы должны уделить этому время и создать приятную теплую обстановку », — говорит Руше. «Люди одомашнили Saccharomyces cerevisiae , но в мире существует так много разных видов дрожжей. Закваски содержат много диких дрожжей, многие из которых не относятся к Saccharomyces . Они такие интересные организмы.

    Микроскопия спор, гиф, цистидий, трамы для выявления грибов

    Приведенная ниже информация представляет собой обобщенный отрывок из последней книги Пэта О’Рейли, «Очарованный грибами» .Полную информацию и образцы страниц можно найти в нашем книжном магазине, где вы можете заказать онлайн-копию, подписанную автором . .. (Книга также содержит глоссарий микологических терминов, и у нас есть краткая версия здесь, чтобы помочь новичкам …)

    Микроскопия и фотомикография

    Если вы не можете определить грибок в поле, вы можете принести образец домой для дальнейшего изучения. Нет смысла делать это, если нет того, что вы можете делать дома, чего не могли бы делать в поле.Микроскопическое исследование — это то, что лучше всего проводить в помещении, когда у вас есть достаточно времени, чтобы все сделать правильно. Вот несколько советов по выбору и использованию микроскопа для этой цели.

    Игрушечные микроскопы подходят для изучения структур животных и растений, но для микологии вам действительно нужен хороший микроскоп. Это потому, что тонкие структуры грибов очень малы — некоторые из них близки к пределу того, что можно разрешить с помощью света. Длины волн рентгеновского излучения намного короче, чем у световых волн, поэтому гораздо больше деталей можно изучить с помощью рентгеновской микроскопии. Но если вы думаете, что оптический микроскоп — дорогостоящий инструмент для чего-то, что для большинства из нас является просто хобби, даже не думайте перезакладывать свой дом под рентгеновский микроскоп нижнего диапазона.

    Споры
    азонитов Lactarius , видимые через линзу масляного иммерсионного микроскопа

    Для изучения спор грибов, базидий, цистидий, сфероцист и других мелких особенностей грибов вам понадобится микроскоп с увеличением не менее 400 раз. В идеале используйте микроскоп с максимальным увеличением в 1000 раз, но для получения достаточно четких изображений при таком большом увеличении он должен иметь масляную иммерсионную линзу.

    Размеры и орнамент (например, остроконечные бородавки — см. Рисунок слева) спор являются ключевыми отличительными признаками, и для того, чтобы вы могли измерить размеры предметов, на которые вы смотрите, вам понадобится окуляр с окулярным микрометром или каким-либо другим способом. другие средства калибровки. Если вы находите инструкции, прилагаемые к микроскопу, сбивающими с толку (или если вам посчастливится заключить сделку с подержанными товарами без справочника), кто-то из вашей местной группы грибов почти наверняка захочет помочь вам настроить и откалибровать система.

    Мой собственный микроскоп — тринокулярный, поэтому адаптер камеры можно использовать, даже когда я смотрю в окуляры. (Большую часть времени я просто наблюдаю изображение, которое передается на экран моего компьютера.)

    Другие обязательные функции микроскопа:

    1. Регулируемое освещение, чаще всего непосредственно под слайдом, и называется освещением светлого поля. (Для биологических инструментов освещение темного поля также осуществляется снизу, но под углом, который гарантирует, что прямой свет не попадает в объектив; для этого требуется либо специальный конденсор темного поля, либо, для малого увеличения, черный ограничитель, вставленный на пути света.)
    2. Ручки управления перемещением механического предметного столика, удерживающего ползун
    3. Элементы управления грубой и точной фокусировкой

    Окрашивающие химикаты

    Сфероцисты в структуре стебля
    Russula cyanoxantha , лесного гриба, широко известного как древесный уголь, ответственны за его хрупкость. Этот снимок был сделан с помощью микроскопа с увеличением x600. Материал стержня на предметном стекле окрашивали Конго красным.

    Тонкая структура спор и многие другие крошечные части грибов, на которые вы захотите взглянуть под микроскопом, почти полностью прозрачны.Их можно отчетливо увидеть только тогда, когда они были окрашены. В качестве дополнительной помощи в идентификации многие грибы производят споры, которые меняют цвет при контакте с определенными химическими веществами, называемыми реагентами (из-за реакции, когда споры вступают с ними в контакт). Вот некоторые из химикатов, красителей и реагентов, наиболее часто используемых в микологической микроскопии:

    Вода дистиллированная

    (Да, старый добрый h3O!) Если вы хотите рассмотреть крошечные объекты и увидеть их естественные цвета, вода — идеальный смачивающий агент.Водопроводная вода содержит химические добавки, которые могут ограничить срок службы горки, а дождевая вода является кислой и не менее проблематичной, но дистиллированная вода недорогая и легкодоступная. Возможно, вам потребуется добавить каплю смачивающего агента для фотографий, чтобы избежать искажения изображения из-за крошечных пузырьков воздуха, прикрепленных к спорам или другому материалу объекта. (Жидкость для мытья посуды работает!) Добавление примерно 10% глицерина гарантирует, что слайды прослужат намного дольше до высыхания.

    Аммиак (Nh4)

    Это полезное, но потенциально опасное химическое вещество выделяет чрезвычайно едкий пар, поэтому флакон должен быть надежно закрыт все время, кроме периода использования.(Подойдет бытовой аммиак из любого строительного магазина.) Аммиак является не только реагентом, вызывающим изменение цвета у некоторых видов грибов, но и компонентом некоторых других реагентов. Чистый аммиак — это газ при нормальной комнатной температуре, и для микологического использования 10% раствор в дистиллированной воде является нормальной концентрацией. Это сильно, и если попадет в глаза, то может серьезно повредить.

    Сульфат железа (FeSO4)

    Многие любители грибов и микологи несут в своих полевых наборах кристалл сульфата железа, известный в просторечии как соли железа, для растирания грибов (в частности, хрупких жабр) для проверки цветовой реакции. Не тратитесь на покупку кристаллов фармацевтического качества; то, что продается в садовых центрах как средство от мха и для снижения щелочности почвы, дешево (ой!) и работает так же хорошо.

    Гидроксид калия (КОН)

    Используется как монтажная среда (обычно вместе с окрашивающим химикатом), так и как реагент, либо в полевых условиях, либо на базе. Поверхность шляпки или жабры некоторых грибов резко меняет цвет при контакте с КОН; они могут стать желтыми, красными, пурпурными, оливковыми или черными, например, в зависимости от вида.Таким образом, когда вы делаете предметное стекло микроскопа с использованием КОН, оно не только предохраняет его от разложения, но также может вызвать диагностическую цветовую реакцию, которая иногда может вносить такой же вклад в процесс идентификации, как и данные о размере и форме, полученные с помощью микроскопа.

    Реагент Мельцера

    Этот коктейль химикатов сложно получить, потому что одним из важнейших компонентов является потенциально опасное вещество хлоралгидрат (препарат от изнасилования на свидании). Остальные компоненты легко получить — кристаллы йода, йодид калия и дистиллированная вода.Йод вступает в реакцию с крахмалистыми веществами, образуя интенсивный сине-черный цвет, и споры грибов, содержащие крахмал, называют «амилоидом». Если вы присоединитесь к группе грибов в Великобритании, вы сможете получить реагент Мельцера через Ассоциацию британских групп грибов (ABFG). Споры грибков могут измениться в диагностическом цвете при окрашивании реагентом Мельцера. Споры обозначаются:

    .
    1. Амилоид , если они приобретают сине-черный цвет.
    2. Декстриноид , если они приобретают красновато-коричневый цвет.
    3. Инамилоид (или отрицательный) , если они просто становятся желтоватыми или вообще не меняются.

    Эти термины используются в полевых справочниках, в которых перечислены символы химических тестов для каждого вида.

    Пятна

    Asci из
    Poronia punctata , Nail Fungus

    Основными причинами использования красителей при изготовлении предметных стекол микроскопа являются:

    1. увеличить контраст на микроскопическом изображении
    2. выделить отдельные тканевые структуры

    Часто пятна используются вместе с другими химикатами, которые помогают предотвратить гниение или высыхание материала.

    Примеры окрашивающих агентов:

    Красный Конго

    Превосходный краситель общего назначения для изучения мелких деталей структуры гиф (например, см. Рисунок Amanita rubescens gill trama, справа, где отмеченные размеры указаны в микронах). Он поставляется в виде порошка и лучше всего растворяется в 10% раствор аммиака.

    Сафранин

    Еще один краситель, вырабатывающий ядра эритроцитов.

    Лактофенол, синий хлопок

    Окрашивает хитин, делая такие структуры, как орнамент споры, более отчетливым, чем с большинством других красителей (включая конго красный).

    Прощальный выстрел — ну, это больше для того, чтобы не уйти. Вышеупомянутые химические вещества включают в себя некоторые сильно едкие, кислотные и токсичные вещества, поэтому они действительно должны храниться в недоступном для детей месте. Пары аммиака, например, могут обжечь глаза — на самом деле, некоторые тесты просто требуют, чтобы пары аммиака прошли через ткань грибов, чтобы вызвать изменение цвета.

    Надежный сейф может спасти жизнь. Один у меня прикручен к стене рядом со столом, на котором я держу микроскоп (см. Рисунок выше), и он идеально подходит для хранения химикатов, лезвий для бритвы, предметных стекол и т. Д.

    Вверху: споры грибка апельсиновой корки
    Aleuria aurantia

    Изготовление слайдов

    Легче всего сделать слайды из спор. (Здесь показаны споры Agaricus bisporus , коммерческого шампиньона, который всегда можно купить в продуктовых магазинах и супермаркетах.) Все, что вам нужно сделать, — это поместить гриб плодородной стороной вниз на предметное стекло микроскопа и подождать час или два. .

    В отличие от того, когда вы пытаетесь сделать красивый отпечаток спор, вам даже не нужно все закрывать, хотя я обычно делаю это как напоминание, что под ним есть кусок стекла с острой кромкой.Поскольку вы хотите видеть отдельные споры, а не определять их цвет при наложении слой за слоем, вам не нужен плотный отпечаток, поэтому не следует оставлять его слишком долго.

    Как только на предметном стекле окажется немного споровой пыли, добавьте каплю смачивающего средства (подойдет мыльная вода!) Или подходящее пятно, если споры прозрачные, а не окрашенные, и положите сверху покровное стекло. Реагент Мельцера — хороший выбор, потому что, одновременно с улучшением контраста, если вы поднесете предметное стекло к свету, вы сможете увидеть, являются ли споры амилоидом, декстриноидом или инамилоидом — об этом позже….

    Изготовление слайдов из очень тонких срезов грибковой ткани сложнее, и вам следует ожидать больше неудач, чем успехов. Сложность состоит в том, чтобы создать действительно тонкий и ровный срез, содержащий функции, которые вы хотите изучить. На жабрах агарикоидных видов вы можете изучить базидии — (обычно) булавовидные отростки гиф, на которых переносятся стеригматы и споры.

    После того, как вы отрежете тонкую полоску острым лезвием или оторвите полоску с помощью пинцета с острым носом, процесс будет таким же, как и для предметных стекол со спорами. Поместите образец на предметное стекло, добавьте несколько капель морилки и затем покровное стекло, слегка надавливая на срез. Будьте осторожны: большинство покровных стекол имеют толщину немногим более одной десятой миллиметра, и они очень легко ломаются. Удалите излишки пятна с помощью впитывающей ткани и подождите несколько минут, пока пятно не пропитается образцом.

    Вариант этого подхода — более простой, но более простой — это раздавить довольно тонкий образец между двумя слайдами — если повезет, интересующие вас кусочки вылетят на одном из краев.Используйте морилку, как и раньше, чтобы выделить эти края.

    При изучении базидиомицетов под микроскопом вы не ограничены размером и формой спор. Вы также можете исследовать различные виды цистидий. Это структуры гиф, которые выделяются на различных поверхностях. В зависимости от того, где они встречаются, им дают разные названия: плевроцистидии — на жаберных поверхностях, хейлоцистидии — на жаберных краях, пилеоцистидии — на поверхности шляпки, а калоцистидии — на стебле гриба. Формы цистидий в каждом из этих мест могут быть разными, и эти различия могут помочь вам, э-э … различать виды.

    На микрофотографии, показанной выше, изображена жаберная трама Hygrocybe chlorophana , Golden Waxcap. Не все восковые шапки можно идентифицировать до уровня вида, исследуя макроскопические признаки. Некоторые из них лучше всего определить, исследуя их под микроскопом, в то время как для некоторых требуется как макроскопическое, так и микроскопическое исследование. Сдавление крошечного кусочка жаберного материала (жаберной трамы) между предметным стеклом и покровным стеклом позволяет изучить структуру ткани.Некоторые имеют переплетенные гифы; некоторые из них правильные (гифы лежат параллельно друг другу), а другие — субрегулярные (где-то посередине). Здесь отчетливо видны длинные клетки Hygrocybe chlorophana , тогда как клетки гиф, например, Hygrocybe miniata , Vermillion Waxcap) намного короче.

    Программное обеспечение, чтобы сделать фотографирование с микроскопа менее утомительным

    Если вы когда-либо пытались сфотографировать споры или другие кусочки грибковой ткани под микроскопом, вы знаете, как сложно получить все в фокусе. Одна часть получается резкой, а остальная — размытой. Проблема вызвана очень ограниченной глубиной резкости, доступной при большом увеличении. На помощь вам может прийти специализированное, но недорогое программное обеспечение. Вы делаете несколько изображений с фокусировкой на разной глубине в образце ткани, а программное обеспечение создает изображение, используя сфокусированные части ваших различных изображений. Измерение спор грибов стало намного проще с программой Mycocam4. Он был выпущен микологом Ричардом Шотболтом и доступен для бесплатной загрузки по адресу www.shotbolt.com — и им очень просто пользоваться.

    Микроскопия — это специализированный предмет, и не то, чем хотят заниматься все, кто интересуется грибами. Для получения более подробной информации по этой теме есть специальные тексты, а для помощи в выборе и настройке микроскопа — веб-сайты надежных независимых поставщиков, таких как Микроскопы Brunel — хорошая отправная точка. Обычно можно договориться о встрече, чтобы обсудить ваши конкретные потребности и опробовать несколько альтернатив.

    Примеры

    На многих страницах, посвященных видам грибов, вы увидите примеры фотографий спор, сделанных с помощью микроскопа с цифровой камерой. Например, см. Laccaria bicolor , у которого есть интересные украшения из споров; и Cuphophyllus pratensis , который имеет эллипсовидные или каплевидные или субглобальные споры.


    Если вы нашли эту информацию полезной, мы уверены, что вы также найдете очень полезной нашу книгу Пэта О’Рейли Очарованные грибами .Подписанные автором копии в твердом переплете по специальной цене со скидкой доступны здесь …

    Другие книги о природе из First Nature

    Идентификация Candida auris | Candida auris | Грибковые заболевания

    Как идентифицировать
    C. auris

    Диагностические устройства, основанные на матричной лазерной десорбции / ионизации по времени пролета (MALDI-TOF), могут отличать C. auris от других видов Candida , но не все справочные базы данных, включенные в устройства MALDI-TOF, позволяют обнаружение.В настоящее время точная идентификация C. auris может быть выполнена с использованием бренда Bruker Biotyper MALDI-TOF с использованием обновленной библиотеки системы MALDI Biotyper CA, одобренной Bruker FDA (пункт 4 версии) или их библиотек «только для исследовательского использования» (версии 2014 [ 5627] и более поздние версии) и с использованием MS bioMérieux VITEK (MALDI-TOF) с использованием одобренного FDA IVD v3.2 или их библиотек «только для исследовательских целей» (с базой данных Saramis Ver 4.14 и обновлением Saccharomycetaceae).

    Дополнительные базы данных MALDI-TOF, которые включают дополнительные C.Штаммы auris из всех четырех филогенетических клад могут позволить пользователям преодолевать проблемы идентификации, обеспечивая постоянно более высокие баллы идентификации MALDI. MicrobeNet — это один из примеров бесплатной онлайн-базы данных MALDI о редких и необычных патогенных микроорганизмах, которую курируют эксперты CDC. Пользователи MicrobeNet будут иметь доступ к спектральным библиотекам CDC C. auris MALDI, а также к самой последней базе данных Bruker (все бесплатно при входе в MicrobeNet).

    Молекулярные методы, основанные на секвенировании области D1-D2 рДНК 28s или внутренней транскрибируемой области (ITS) рДНК, также могут идентифицировать C.auris . Панель GenMark ePlex для идентификации грибковых патогенов (BCID-FP) — это первый одобренный FDA молекулярный тест для идентификации C. auris . Для обнаружения C. auris были разработаны различные методы ПЦР, которые доступны в научной литературе. Протокол CDC PCR доступен здесь значок pdf [PDF — 11 страниц]. При выборе метода ПЦР для проверки необходимо учитывать такие факторы, как чувствительность и специфичность метода, доступные лабораторные возможности и оборудование, клиническая оценка метода на сопоставимом типе клинической пробы, стоимость и время получения результатов.

    VITEK 2 с версией программного обеспечения 8. 01 также должен уметь точно определять C. auris , хотя сообщалось о неправильной идентификации штаммов из определенных клад, и все Candida duobushaemulonii должны быть отправлены для дальнейшей идентификации (см. Значок алгоритма идентификации в формате pdf [ PDF — 9 стр.]).

    Поскольку C. auris продолжает получать признание, обновленные версии других платформ идентификации дрожжей могут быть в состоянии идентифицировать C.auris ; пожалуйста, проконсультируйтесь с производителем прибора для получения дополнительной информации.

    Лаборатории, способные дополнительно охарактеризовать изоляты при подозрении на C. auris , поощряются к этому. Подозрительные изоляты также могут быть отправлены в сеть лабораторий CDC AR Lab для идентификации и тестирования чувствительности к противогрибковым препаратам. Это тестирование проводится бесплатно и может потребовать согласования в рамках Программы по инфекциям, связанным со здравоохранением (HAI) Департамента здравоохранения штата. Изоляты следует отправлять на скосах при комнатной температуре. C. auris может расти на скошенном кровяном или шоколадном агаре; Среды для микологии не нужны, если их нет в лаборатории. Чтобы узнать больше об использовании сети AR Lab Network и найти список региональных лабораторий AR Lab Network, посетите страницу How AR Lab Network Works. Кроме того, CDC и некоторые государственные лаборатории здравоохранения могут помочь с идентификацией изолята C. auris .

    Для лабораторий, заинтересованных в выполнении C.Внутреннее тестирование колонизации auris , руководство по обработке мазков для оценки колонизации C. auris доступно в разделе «Руководство по обнаружению колонизации Candida auris ».

    Обо всех подтвержденных идентификациях C. auris следует сообщать местным и государственным органам здравоохранения и CDC по телефону [email protected] .

    .