Электрофорез, сделать процедуру в СПб

Электрофорез – методика лечения, основанная на воздействии на тело пациента током. Через поврежденные участки кожи или слизистых оболочек в организм поступают ионы. Это достигается за счет постоянного либо импульсного тока.

Механизм действия

Ток раздражает кожу, вызывая различные реакции организма. Стимулируются тканевые обмены, кровообращение, процессы восстановления после разных заболеваний. После дозированного воздействия током в верхний слой кожи – эпидермис – поступают ионы лекарства. Потом они медленно распределяются по организму и вымываются лимфо- и кровотоком.

Преимущества электрофореза

Этот метод широко распространен в медицине и знаком практически каждому человеку. В сравнении с другими способами доставки в организм лекарственных средств, электрофорез имеет следующие преимущества:
• Возможность одновременного введения нескольких препаратов.
• Лекарства долго воздействуют на организм, но не вызывают общую интоксикацию.

• Можно напрямую воздействовать на пораженный участок кожного покрова.
• После сеанса лекарственные препараты долго остаются в коже, потому что формируется специальный очаг. Потом они медленно поступают в организм и разносятся по нему с кровью.
• Ионы – это хорошо действующая методика лечения.

Противопоказания

Эта методика категорически противопоказана при следующих состояниях:
• индивидуальная непереносимость;
• дерматозы;
• онкология;
• заболевания сердечно-сосудистой системы;
• частые кровотечения.

Перед началом курса процедур нужно проконсультироваться с лечащим врачом. В «СМ-Клиника» вы можете получить грамотную консультацию любого врача, который пропишет лечение в индивидуальном порядке с учетом протекания болезни и переносимости определенных препаратов.

На подготовительном этапе делается кожная проба. Это слабое воздействие, чтобы определить непереносимость и чувствительность. Только после этого принимается решение о возможности делать электрофорез.

Существует много показаний к применению этой методики. Однако проводить сеансы нужно только под наблюдением врача.

Лекарственный электрофорез

Один из вариантов проведения электрофореза – с использованием цинка. Только в «СМ-Клиника» в Санкт-Петербурге проводятся:

• классические сеансы электрофореза с цинком;
• в гинекологии – по вагинальной методике;
• в урологии – по ректальной технике;
• по трехэлектродному методу;
• по Щербаке;
• по Вермелю;
• по Бургиньону;
• полумаской Бергонье.

«СМ-Клиника» продолжает классические традиции физиотерапии, направленные на лечение, профилактику и восстановление.

Чем полезен цинк? Какова его роль в организме?

Это один из самых главных элементов, входящий в состав более чем 40 ферментов организма человека. Цинк участвует в формировании иммунитета, поддержании уровня гормонов, стабилизирует рост. Цинк содержится в крови, мышцах, печени, костях, почках, сетчатки глаз.

Он способствует долгой жизни и сохранению молодости, устраняет усталость, выполняет функцию антиоксиданта.

Сегодня даже у молодых людей снижено содержание цинка в организме, по оценкам специалистов. Это негативно сказывается на женской репродуктивной функции, состоянии эндокринной системы.

Девушки с нехваткой цинка подвержены недостаточной выработке половых гормонов. У них продолжается рост, когда погодки уже остановились в росте. У них очень длинные конечности, внешне они выглядят инфантильными. Нарушается менструальный цикл и отложение жировой ткани.

У мужчин цинк контролирует рост простаты, профилактирует аденому, бесплодие. Этот элемент активизирует сперматозоиды и в целом половые гормоны.

Важно повышать уровень цинка пожилым людям, потому что иначе теряется слух, прогрессирует атеросклероз, часто возникают инфекции. Если цинк в норме, то хорошо функционирует мозг – сохраняется память, внимание и т. д.

Цинк активизирует витамины Е и А, то есть без него невозможна регенерация кожи, правильная работа сальных желез, рост ногтей и волос.

Цинк участвует в борьбе с угрями.

В цинке нуждаются зубы человека. Он обеспечивает профилактику инфекционных болезней полости рта и десен.

При насыщении цинком суставов проходит боль, повышается устойчивость к физическим нагрузкам.

Показания к электрофорезу с раствором цинка

• Акне на теле и лице.
• Повышенные физические нагрузки. Цинк повышает выносливость и силовые показатели.
• Иммунодефицит.
• Сахарный диабет.
• Раны, дерматиты, ожоги, пролежни, экземы.
• Артриты, ревматизм, остеохондроз позвоночника, артрозы.
• Синдром хронической усталости.
• Бесплодие – мужское и женское, – которое вызвано воспалениями (простатит, эндометрит), недостаточностью или нарушением баланса половых гормонов.
• Заболевания органов ЖКТ – язва, гастрит, гепатоз, гепатит, панкреатит, синдром раздраженного кишечника.

• Диффузные и гнездные алопеции.
• Дегенеративно-дистрофические болезни суставов позвоночника и конечностей.

Проконсультируйтесь с врачом, имеются противопоказания.

 

Приём физиотерапевта в наших клиниках

Электрофорез в лечении заболеваний позвоночника и суставов.

Аппарат для электрофореза
МИТ-ЭФ2

Электрофорез (ионофорез) –это метод физиотерапии который заключается во введении в ткани тела лекарственного вещества через неповреждённую кожу с помощью постоянного электрического тока (гальванического тока). Применяется

электрофорез как лечебный метод с 1802 года. Таким образом, ему уже около 210 лет, однако он до сих пор не утратил своей актуальности.

 Как действует электрофорез.

 С помощью электрического тока ионы лекарственного вещества движутся от одного электрода к другому (от «+» к «–» или наоборот, в зависимости от заряда ионов лекарства), проходя через ткани тела, и задерживаясь там, создавая высокие концентрации лекарства в зоне воздействия. Высокая концентрация лекарственного вещества может сохраняться в тканях организма до 15  и более часов, оказывая необходимый терапевтический эффект.

 Крайне важно то, что методом электрофореза можно лечить органы с нарушенной микроциркуляцией, куда невозможна доставка лекарства с кровотоком. Такая ситуация может сложиться при диабетической ангиопатии сосудов нижних конечностей, тромбозах крупных кровеносных сосудов, некрозах тканей.

 Также большое значение имеет тот факт, что при электрофорезе лекарство доставляется напрямую к больному органу, не проходя через печень и другие фильтры организма. Таким образом, лекарственное вещество оказывает меньшее токсическое действие на печень и системы выделения. При таком способе лечения требуется меньшая доза лекарства, хотя его концентрация в тканях, требующих лечения, гораздо выше.

 Интересно, что во время электрофореза (ионофореза) лекарственные вещества приобретают заряд, и поступают к больным тканям в виде ионов, которые обладают гораздо большей терапевтической активностью.

 Выгодные отличия электрофореза от инъекционного введения лекарств.

1. При электрофорезе лекарство более концентрированное, а суммарная доза гораздо меньше.

2. Лекарство напрямую доставляется в ткани организма, не проходя обработку в печени, и оказывая на неё                 меньшее токсическое действие.

3. В тканях более длительное время задерживается необходимая концентрация лекарства.

4. Действие лекарства эффективнее за счет ионизирования его при электрофорезе.

5. Слабый гальванический ток также оказывает лечебное действие. Он улучшает кровообращение,                                  уменьшает отёк и воспаление.

6. Лечение комфортное, безболезненное и неинвазивное (не повреждаются кожные покровы), в отличие от                  инъекционного введения.

7. Меньше аллергических реакций, поскольку лекарственное вещество вводится в чистом виде без                                  примесей и растворителей.

 Воздействие гальванического тока при электрофорезе.

 Гальванический ток сам по себе обладает противовоспалительным, обезболивающим, иммуностимулирующим действием. Это способствует усилению действия процедуры на организм.

Наряду с этим, постоянный ток низкого напряжения ионизирует лекарственное вещество, делая его более активным. В результате достигается тот же лечебный эффект меньшей дозой лекарства.

 Как выполняется процедура электрофореза.

 На практике процедура электрофореза проводится очень просто. Используются две тканевые прокладки по размеру электродов. Они должны быть сшиты таким образом, чтобы электрод свободно входил внутрь прокладки и полностью был покрыт ею с двух сторон. Прокладки кипятятся, отжимаются и остывают.

Перемещение ионов лекарства
при электрофорезе.

На теплую влажную прокладку наносится раствор лекарственного вещества, причём лекарство наносится строго на положительный или отрицательный электрод, соответсвенно таблице. Далее электроды в тканевых прокладках прикладываются к коже пациента и сверху фиксируются целлофановой плёнкой или целлофановыми мешочками с песком.

Пациента укрывают и включают аппарат. Силу тока нужно добавлять плавно, и выставить такой уровень, чтобы пациент ощутил лёгкое покалывание в месте наложения электродов. Ни в коем случае больной не должен ощущать жжение или боль вовремя процедуры, есть опасность ожога.

Длительность сеанса электрофореза от 10  до 15 минут. Курс обычно включает 10 – 20 сеансов электрофореза, которые могут отпускаться каждый день или через день.

 Показания для применения электрофореза.

 Электрофорез (ионофорез) – это универсальный метод лечения. С помощью него можно вводить очень многие лекарственные вещества. Он используется при заболеваниях органов дыхания, в гинекологии, офтальмологии, косметологии, заболеваниях позвоночника и суставов, внутренних болезнях.

Назначается электрофорез для чрескожного или полостного введения антибиотиков, витаминов, противовоспалительных и обезболивающих средств, отхаркивающих, хондропротекторов и других препаратов. В центре вертебрологии доктора Ковриженко электрофорез используется очень широко.

Он назначается при болях в спине, при остеохондрозе и его осложнениях —  протрузиях и грыжах межпозвонковых дисков, при заболеваниях суставов – деформирующем артрозе и плече-лопаточном периартрозе, эпикондилите, бурсите, тендините и тендовагините, невритах и невралгиях, полиневропатиях. В нашем центре процедура электрофореза назначается как в комплексном лечении, так и как самостоятельный метод терапии.

 Грамотное применение электрофореза в комплексе лечения заболеваний опорно-двигательного аппарата позволяет нашим специалистам быстро снять болевой синдром, уменьшить продолжительность лечения и ускорить выздоровление.

 Противопоказания для назначения электрофореза.

Противопоказания такие же, как и для всех остальных электропроцедур. А именно: различные онкозаболевания, болезни и повреждения кожи, острые инфекционные заболевания, высокая температура тела, психические заболевания, наличие кардиостимулятора, при тяжёлом общем состоянии пациента, кахексии, при нарушениях ритма сердца, высоком артериальном давлении.

 Таким образом, электрофорез (ионофорез) является эффективной современной физиотерапевтической процедурой и с успехом применяется во многих областях медицины.

 Также Вы можете ознакомиться с другими методами физиотерапии, которые применяются в нашем центре:

Магнитолазерная терапия,

Электромиостимуляция.

 Если у Вас есть вопросы по поводу электрофореза или других методов лечения, можете задать их на странице ВОПРОС ВРАЧУ, или приходите на бесплатную консультацию к специалистам в наш центр.

Записаться на приём.

Электрофорез для детей на воротниковой зоне, также проведения электрофорез для грудничков в Евромед

Проведение лечебных процедур электрофорезом в Омске. Электрофорез — метод введения лечебных препаратов через кожный покров, под действием электрического поля. При этом лекарство вводится в наиболее химически активной форме.

• Консультация
• Диагностика
• Лечение

Электрофорез — это метод введения лекарственного вещества под действием электрического поля в организм. Лечение электрофорезом проводится как через кожные покровы (в неврологии, травматологии и др.), так и через слизистые оболочки (в стоматологии, оториноларингологии, гинекологии и др.). Вещество вводится непосредственно в очаг воспаления в малых, но достаточно эффективных дозах, накапливаясь в тканях и действуя продолжительное время.

Поэтому особенно актуален электрофорез для детей, т.к. дает возможность местно использовать лекарства, которые в раннем детском возрасте нельзя применять другими способами. При этом лекарство вводится в наиболее химически активной форме — в виде ионов – и не разрушается, как например, при введении через рот. При проведении электрофореза электрический ток благоприятно влияет на реактивность и иммунобиологический статус тканей.

Этот метод применяется применяется с самого раннего возраста — например, электрофорез для грудничков используется уже спустя 3-6 недель после рождения. Для детей до года при этой процедуре в качестве лекарственного вещества часто используется эуфиллин как средство, снимающее тонус гладкой мускулатуры и улучшающее кровообращение (в основном, проводится электрофорез на воротниковую зону).

В целом выбор зоны проведения электрофорез зависит от заболевания: так, электрофорез воротниковой зоны проводится при заболеваниях нервной или сосудистой системы, электрофорез конечностей — при заболеваниях суставов, электрофорез поясничной зоны — при гинекологических заболеваниях и т. п.

Вернуться на страницу:

Остались вопросы?

 

Лечение электрофорезом, лечебный электрофорез в физиотерапии в Алматы – onclinic.kz

Лечебный электрофорез представляет собой воздействие электрических импульсов, посредством которых лекарственные препараты преобразовываются в мельчайшие частицы — ионы и доставляются к больным зонам.

Электрофорез физиотерапия проводится специальным аппаратом, который подает постоянный ток через противоположно заряженные электроды. На металлические пластинки электродов надевается влажная ткань, смоченная лекарственным средством. Лекарство под действием тока проникает в организм через наружные ткани тела и оказывает эффективное терапевтическое воздействие.

Применение электрофореза

Лечение электрофорезом позволяет вводить небольшие концентрации препаратов непосредственно в очаг заболевания, оказывая минимальное влияние на весь организм и создавая при этом длительный лечебный эффект. Применение электрофореза назначается при следующих заболеваниях:

• заболевания дыхательной системы и ЛОР-органов (тонзиллит, синусит, фарингит, бронхит и т.п.)
• болезни органов зрения (кератит, блефарит)
• заболевания нервной системы (невралгии, невриты, нарушения спинного и головного мозга
• болезни пищеварительной системы (гастрит, панкреатит, язвенная болезнь и др.)
• сердечно-сосудистые патологии (гипертоническая болезнь, атеросклероз, варикоз)
• электрофорез для лица и другие дерматологические поражения кожи (акне, дерматит, фурункулы и др.)
• заболевания мочеполовой системы (электрофорез гинекология вагинита, эндометрита, цистита)
• проблемы опорно-двигательного аппарата (артроз, остеохондроз, артрит)

Виды электрофореза

Виды электрофореза могут отличаться как по способу проведения процедуры, так и по заболеваниям и лекарственным препаратам, которые назначаются доктором.

Электрофорез с карипазимом

Карипазим – растительный препарат для лечения межпозвоночной грыжи. Обычно, чтобы получить устойчивый клинический эффект, назначают 2-3 курса по 15-20 сеансов.

Ванночковый электрофорез

В специальную ванночку, оборудованную электродами помещают назначенные лекарства. Такой способ терапии применяют для лечения заболеваний суставов, артритов, плекситов, полиартритов и других болезней нервной системы.

Электрофорез с эуфиллином

Электрофорез с эуфиллином обладает выраженным бронхорасширяющим действием, улучшает кровоснабжение внутренних органов, имеет болеутоляющий эффект. Эуфиллин применяют для лечения легочных, неврологических, сосудистых заболеваний.

Электрофорез с лидазой

Электротерапия с лидазой улучшает сосудистую и тканевую проницаемость и назначается в гинекологии и хирургии для лечения спаечных процессов.

Электрофорез с кальцием

Применяется для восполнения потерь кальция, как сосудоукрепляющее, противовоспалительное, дезинтоксикационное и противоаллергическое средство.

Электрофорез с калием

Применяется в лечении заболеваний дыхательных путей, бронхиальной астмы, при глазных патологиях.

Польза электрофореза

Электрофорез лекарственный обладает такими преимуществами, как лечение широкого спектра заболеваний и высокая эффективность лечебного курса. Польза электрофореза в том, что медикаментозные препараты, которые вводятся при электрофорезе, хорошо усваиваются благодаря активной ионной форме. Процедура электрофорез — одна из самых популярных и эффективных не только в Казахстане, но и в мире. Это один из проверенных и безопасных методов лечения, который можно применять беременным и новорожденным уже на 3 сутки.

В международном медицинском центре On Clinic Алматы для лечения пациентов успешно применяется такая процедура, как электрофорез. Цена процедуры входит в стоимость комплексного лечения, назначенного врачом. В кабинете физиотерапии On Clinic работают опытные специалисты, которые успешно проводят все виды электрофореза. Заказать услугу можно прямо сейчас на нашем сайте через форму онлайн-записи.ссссс

Электрофорез | Поликлиника ЦКБ РЖД-Медицина

Электрофорез лекарственных веществ – особый электрофармакологический метод, основанный на сочетанном использовании постоянного тока и вводимых с его помощью лекарственных веществ. Из электрических токов для лекарственного электрофореза применяются гальванический (в 80-85 %), диадинамические, синусоидальные модулированные (в выпрямленном режиме), прямоугольный импульсный и флюктуирующий (форма № 3) токи.

Механизм физиологического воздействия

При электрофорезе лекарственные вещества в организм проникают через выводные протоки потовых и сальных желез, межклеточные промежутки, волосяные фолликулы и в меньшей степени – чресклеточно. Во время процедуры лекарственные вещества проникают неглубоко: сразу после элекрофореза основная часть лекарства обнаруживается в эпидермисе и дерме, создавая депо. Однако от процедуры к процедуре глубина электрогенного перемещения вводимого препарата возрастает. К тому же следует иметь в виду, что за счет диффузии часть лекарственных веществ быстро достигает кровеносных и лимфатических сосудов, разносясь ко всем органам и тканям. Весьма важно, что из кровотока лекарственные вещества вторично поступают преимущественно в органы и ткани, расположенные в зоне проведения процедуры. Это обосновывает целесообразность использования лекарственного электрофореза для лечения как поверхностно, так и глубоко расположенных патологических процессов, а также заболеваний внутренних органов.

Действие лекарственного электрофореза как электрофармакологического метода складывается из сочетанного действия физического фактора (гальванический или другие токи) и введенного лекарственного вещества. Ответная реакция организма при этом не является простой суммацией эффектов, вызванных этими двумя факторами, составляющими единый терапевтический комплекс. Она значительно сложнее и разнообразнее. Важно помнить, что действие вводимых электрофорезом лекарств развивается несколькими путями (рефлекторное, местное и гуморальное) и, варьируя технику и методику проведения процедуры, ими можно управлять.

Особенности и достоинства лекарственного электрофореза:

1. Лекарственные вещества, вводимые электрофорезом, задерживаются в поверхностных слоях кожи и образуют здесь так называемое кожное депо ионов. В нем лекарства могут сохраняться от 12-24 ч до 15-20 суток (адреналин, цинк, медь и др.). Задержка введенных веществ в кожном депо способствует их более длительному действию и медленному выведению из организма.

2. Метод лекарственного электрофореза позволяет создавать высокую локальную (в патологическом очаге) концентрацию препарата, не насыщая им весь организм. Согласно имеющимся данным, после электрофореза содержание лекарств в тканях области воздействия в несколько раз выше, чем после общепринятых способов введения той же дозы препарата.

3. В отличие от инъекционных способов введения электрофорез позволяет доставить лекарства к патологическому очагу, в котором имеются нарушения микроциркуляции и регионарного кровообращения в виде капиллярного стаза, тромбоза сосудов, инфильтрации и некроза. Такие патологические очаги плохо поддаются лечению традиционными фармакотерапевтическими методами, т.к. поступление лекарственных веществ в них затруднено. При электрофорезе же лекарственные вещества могут поступать в патологический очаг не только гематогенным, но и электрогенным путем.

4. При электрофорезе побочные и аллергические реакции наблюдаются во много раз реже, чем при пероральном или парентеральном применении этих же лекарств. Уменьшение или полное отсутствие побочных реакций при электрофорезе обусловлено рядом причин: невысокой концентрацией лекарства в крови; введением их в наиболее чистом виде; положительным влиянием физического фактора на общую реактивность и иммунобиологический статус организма и др

5. При электрофорезе в организм вводятся только те лекарственные ионы или ингредиенты лекарств, на терапевтическое действие которых рассчитывают. Противоионы и различные примеси, которые могут тормозить действие основного лекарственного иона, в организм при этом не попадают, а остаются на прокладке.

6. В соответствии с сущностью метода при электрофорезе в организм лекарства поступают в виде ионов. И это очень важно, т.к. в ионной форме лекарства значительно активнее, чем в молекулярной, в которой они вводятся при обычных способах их применения.

7. Многих пациентов, прежде всего детей, пожилых пациентов привлекает абсолютная безболезненность метода при его правильном проведении.

8. При лекарственном электрофорезе исключается введение в организм растворителя. Это немаловажное достоинство метода, ибо вводимый при других способах лекарственной терапии растворитель деформирует кожу, нарушает микроциркуляцию и метаболизм в ней, может служить причиной развития постинъекционных инфильтратов.

9. При всей важности приведенных выше особенностей метода все же основным достоинством лекарственного электрофореза, думается, является то, что лекарственное вещество здесь действует на фоне различных, имеющих терапевтическое значение изменений, вызываемых используемым электрическим током. Именно благодаря этому отчетливое специфическое и выраженное лечебное действие вводимых электрофорезом лекарств проявляется при более низких концентрациях, которые при обычных путях их введения были бы малоэффективны.

Продолжительность процедуры зависит от локализации воздействия и вида используемого тока. При общих и сегментарно-рефлекторных методиках она обычно не превышает 15-20 мин, а при местных процедурах – 30-40 мин. Использование флюктуирующих или синусоидальных модулированных токов (в выпрямленном режиме) требует некоторого уменьшения продолжительности лекарственного электрофореза, а при проведении его по методике электросна длительность воздействия, наоборот, обычно удлиняется. Курс лечения лекарственным электрофорезом в зависимости от тяжести состояния больного может быть различным по продолжительности: от 10-12 до 16-20 процедур, проводимых ежедневно или через день.

Показания:

Для лекарственного электрофореза определяются фармакотерапевтическими свойствами вводимого препарата, а также показаниями к использованию физического фактора (гальванического или других постоянных токов). В связи с широким перечнем лекарств, пригодных для электрофореза, и разнообразием используемых электрических токов показания для назначения метода весьма разнообразны.

В принципе трудно найти заболевание, при котором не мог бы быть назначен лекарственный электрофорез. Наиболее целесообразно лекарственный электрофорез применять при тех заболеваниях, при которых показаны как лекарственные вещества, так и используемый при этом электрический ток.

Противопоказания:

• индивидуальная непереносимость лекарственного вещества,
• противопоказания к использованию лекарства и самого электрического тока

 

СТОИМОСТЬ УСЛУГ

 

Запись по телефонам:
+7 (499) 262-11-29, +7 (499) 262-93-61

Физиотерапевтическое отделение
Центральная поликлиника ОАО «РЖД»
Москва, ул. Новая Басманная, д. 5

 

Электрофорез — что это? | Стоматология Доктора Манапова

2019-12-10

Электрофорез – это метод физиотерапевтического лечения, при котором в организм вводится лекарственный препарат посредством электрического тока малой силы. В основе данной процедуры лежит применение специальных лекарственных средств, которые способны распадаться на определенные ионы и под воздействием тока направленно проникать вглубь тканей даже через кожные покровы, но на небольшую глубину. Как правило, лекарство попадает в кровь и моментально разносится по всему организму. Кроме того, оно скапливается в органах, на которые непосредственно оказывается воздействие.

Основное показание к лечению электрофорезом – это инфицирование каналов зуба при пульпите, периодонтите, а также кистах и гранулемах. Благодаря целенаправленному введению лекарственного препарата происходит быстрое и эффективное восстановление зубных каналов, уменьшение болевого синдрома, удаление бактерий. После лечения проводится обязательная пломбировка каналов.

Противопоказания:

• аллергические реакции на вводимые препараты
• гнойные воспалительные процессы в организме
• наличие кардиостимулятора
• тяжелая форма бронхиальной астмы
• злокачественные новообразования
• острые заболевания сердечно-сосудистой системы.

Показания:

• кисты и гранулемы
• пульпит – инфицирование каналов зуба
• периодонтит
• болевые ощущения после лечения или удаления зубов
• альвеолит
• стоматит.

Электрофорез в стоматологии: технология

1. специальная прокладка смачивается в лекарственном препарате и фиксируется на пораженном участке. Если требуется лечение пульпита, то препарат вводится внутрь зуба, предварительно обрабатываются каналы,
2. при помощи специального аппарата, вырабатывающего ток, проводится воздействие на ткань полости рта через прокладку с лекарственным средством.

Длительность одной процедуры – 10-30 минут, проводить их рекомендуется ежедневно или через день. Весь курс занимает от 10 до 20 процедур.

Электрофорез в стоматологии: преимущества

• безболезненность проведения процедуры: возможно лишь незначительное покалывание и жжение,
• быстрое снятие воспалительных процессов внутри канала зуба или в тканях, окружающих его верхушку,
• уменьшение болевого синдрома во время и после лечения различных зубных заболеваний,
• бактерицидное воздействие на ткани,
• целенаправленное введение лекарственного средства, его скопление непосредственно в очаге воспаления,
• минимальный риск развития аллергических реакций на вводимый лекарственный препарат,

увеличение эффективности лекарственных средств: оно медленнее выводится и сохраняется в течение нескольких недель.

Электрофорез в стоматологии: недостатки

• большое количество противопоказаний для проведения лечения.

Электрофорез – это не самостоятельное средство лечения, а, как и любой метод физиотерапии – лишь дополнительный способ восстановления организма при наличии каких-либо заболеваний полости рта. Главное преимущество электрофореза в том, что введение лекарственного препарата в организм происходит целенаправленно, что гораздо более эффективно даже капельниц, внутривенного введения или приема медикамента внутрь. При необходимости возможно выведение лекарственного средства из организма также посредством электрического тока.

ФИЗИОТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ №1

Фельдман Рита Михайловна

Заведущая физиотерапевтического отделения 

Врач высшей квалификационной категории.

 

Физиокабинеты больницы открывались одновременно с открытием взрослой поликлиники и взрослого стационара, затем детского стационара и детской поликлиники. С первого дня функционирования лечебных корпусов физиолечение, было включено в лечение для взрослых больных и детей, оставаясь одним из эффективных методов лечения и до настоящего времени.

Физиотерапевтическое отделение обслуживает больных взрослого и детского стационаров, взрослой и детской поликлиники, обслуживающих население Привокзального и Советского районов.

В физиокабинете детского стационара лечатся больные из педиатрического отделения, психоневрологического отделения для детей, хирургического отделения для детей, отделения патологии новорожденных, отделения для выхаживания недоношенных детей, отоларингологического отделения.

В физиокабинете взрослого стационара лечатся больные из урологического отделения, кардиологического отделения,  нейрососудистого отделения.

Население детской и взрослой поликлиники получает физиолечение по заболеваниям верхних дыхательных путей, заболеваниям бронхов и легких, заболеваниям нервной системы, заболеваниям органов пищеварения, мочевой системы, заболевания сердечно-сосудистой системы, заболевания костно-мышечной системы.

В состав физиотерапевтического отделения входит кабинет физиотерапии в детской поликлинике, взрослой поликлинике, кабинет электролечения, светолечения, кабинет ультравысокочастотной терапии, ингаляторий, кабинет парафинолечения.

Во всех физиокабинетах проводится электрофорез с эуфиллином на воротниковую зону, на грудную клетку; электрофорез с магнезией на воротниковую зону, на грудную клетку, на область правого подреберья; электрофорез хлористого кальция эндоназально и на область тазобедренных суставов, применяется электрофорез новокаина и анальгина на область позвоночника, суставов, а так же введение этих лекарств с помощью импульсивных токов. При экссудативных отитах, тугоухости используется электрофорез иодида калия эндоурально. Широко используется амплипульстерапия и диадинамотерапия при заболеваниях нервной системы и опорно — двигательного аппарата.

В отдельном кабинете отпускаются процедуры ультравысокочастотной терапии при острых воспалительных и гнойных заболеваниях различных органов и тканей. В отделении имеется достаточное количество аппаратов магнитотерапии «Алмаг 02», поэтому магнитотерапия широко используется при различных заболеваниях.

При многих заболеваниях слизистой оболочки, кожи и подкожной клетчатки используется общее и местное ультрафиолетовое облучение.

При заболеваниях верхних дыхательных путей, бронхитах, пневмониях применяются тепловлажные ультразвуковые ингаляции различных медикаментов. При аденоидитах, риносинуситах эффективно используется лазерная терапия эндоназально.

При различной патологии мочевого пузыря, мочевыводящих путей используется ультразвуковая терапия и введение лекарственных средств с помощью ультразвука. В кабинете парафинолечения с большой эффективностью используется парафино-озокеритовая апликации на различные области организма.

Все физиокабинеты оснащены современной аппаратурой: аппаратами магнитотерапии, ультравысокочастотной терапии, светотерапии, аппаратами лазерной терапии, ультразвуковой терапии, аппаратами электротерапии.

В физиотерапевтическом отделении №1 работают мед сестры с большим стажем работы, имеющие высшую и первую квалификационную категорию , повышающие свою квалификацию каждые  5 лет на базе колледжа последипломного образования средних мед работников.

Все мед сестры быстро осваивают работу на физиотерапевтическом оборудовании, поступающим в отделение. В отделении ежемесячно проводятся сестринские конференции по различной тематике, занятия по технике безопасности и противопожарной безопасности, занятия по гражданской обороне.

В 2014 году усилиями администрации больницы открыт кабинет лечебной физкультуры и кабинет массажа в детском стационаре. Кабинет лечебной физкультуры в течении года был полностью оснащен необходимым оборудованием: а именно, шведской стенкой из трех секций, гимнастической скамейкой, детскими велотренажерами, беговой дорожкой, манупедом и степпером, а также большим количеством различных мячей и гимнастическими палочками, что позволило более эффективно проводить реабилитацию детей при: ДЦП, остеопатиях, пневмониях, ортопедической патологии. В кабинете массажа установлен современный массажный стол, что помогает массажистке успешно проводить курсы массажа у больных детей.

 

Что такое гель-электрофорез? | Факты

Электрофорез — это метод, обычно используемый в лаборатории для разделения заряженных молекул, таких как ДНК, по размеру.

• Гель-электрофорез — это метод, обычно используемый в лабораториях для разделения заряженных молекул, таких как ДНК, РНК и белки, в зависимости от их размера.
• Заряженные молекулы движутся через гель, когда через него пропускают электрический ток.
• Через гель пропускают электрический ток, так что один конец геля имеет положительный заряд, а другой конец — отрицательный.
• Движение заряженных молекул называется миграцией. Молекулы движутся навстречу противоположному заряду. Таким образом, молекула с отрицательным зарядом будет тянуться к положительному концу (противоположности притягиваются!).
• Гель состоит из проницаемой матрицы, немного похожей на сито, через которую молекулы могут перемещаться при прохождении электрического тока.
• Более мелкие молекулы мигрируют через гель быстрее и, следовательно, перемещаются дальше, чем более крупные фрагменты, которые мигрируют медленнее и, следовательно, будут перемещаться на меньшее расстояние.В результате молекулы разделяются по размеру.

Гель-электрофорез и ДНК

• Электрофорез позволяет различать фрагменты ДНК разной длины.
• ДНК заряжена отрицательно, поэтому при подаче электрического тока на гель ДНК будет перемещаться к положительно заряженному электроду.
• Более короткие нити ДНК проходят через гель быстрее, чем более длинные нити, в результате чего фрагменты располагаются по размеру.
• Использование красителей, флуоресцентных меток или радиоактивных меток позволяет увидеть ДНК на геле после их разделения. Они появятся на геле в виде полос.
• Маркер ДНК с фрагментами известной длины обычно пропускается через гель одновременно с образцами.
• Сравнивая полосы образцов ДНК с полосами на маркере ДНК, вы можете определить приблизительную длину фрагментов ДНК в образцах.

Как проводится гель-электрофорез?

Подготовка геля

• Гели агарозы обычно используются для визуализации фрагментов ДНК.Концентрация агарозы, используемой для приготовления геля, зависит от размера фрагментов ДНК, с которыми вы работаете.
• Чем выше концентрация агарозы, тем плотнее матрица и наоборот. Меньшие фрагменты ДНК разделяются при более высоких концентрациях агарозы, в то время как более крупные молекулы требуют более низкой концентрации агарозы.
• Чтобы сделать гель, порошок агарозы смешивают с буфером для электрофореза и нагревают до высокой температуры, пока весь порошок агарозы не расплавится.
• Расплавленный гель затем выливают в лоток для отливки геля, и на одном конце помещают «гребешок», чтобы сделать лунки для образца, в который будет помещаться пипетка.
• Когда гель остынет и затвердеет (теперь он будет непрозрачным, а не прозрачным), гребешок удаляется.
• Сейчас многие люди используют готовые гели.
• Затем гель помещают в емкость для электрофореза, и буфер для электрофореза наливается в емкость до тех пор, пока поверхность геля не будет покрыта. Буфер проводит электрический ток.Тип используемого буфера зависит от приблизительного размера фрагментов ДНК в образце.

Подготовка ДНК к электрофорезу

• Краситель добавляется к образцу ДНК перед электрофорезом, чтобы увеличить вязкость образца, что предотвратит его выплытие из лунок и так, чтобы миграция образца через гель видно.
• Маркер ДНК (также известный как стандарт размера или лестница ДНК) загружается в первую лунку геля.Фрагменты в маркере имеют известную длину, поэтому их можно использовать для приблизительного определения размера фрагментов в образцах.
• Подготовленные образцы ДНК затем пипеткой переносятся в оставшиеся лунки геля.
• Когда это будет сделано, крышка помещается на резервуар для электрофореза, чтобы убедиться, что ориентация геля, положительного и отрицательного электродов правильная (мы хотим, чтобы ДНК перемещалась по гелю к положительному концу).

Разделение фрагментов

• Затем включается электрический ток, так что отрицательно заряженная ДНК перемещается через гель к положительной стороне геля.
• Более короткие участки ДНК движутся быстрее, чем более длинные, поэтому перемещайтесь дальше во время прохождения тока.
• Расстояние, на которое ДНК переместилась в геле, можно оценить визуально, наблюдая за миграцией красителя загрузочного буфера.
• Электрический ток остается включенным достаточно долго, чтобы гарантировать, что фрагменты ДНК перемещаются по гелю достаточно далеко, чтобы разделить их, но не настолько долго, чтобы они стекали с конца геля.

Иллюстрация оборудования для электрофореза ДНК, используемого для разделения фрагментов ДНК по размеру.Гель находится в резервуаре с буфером. Образцы ДНК помещают в лунки на одном конце геля, и через гель пропускают электрический ток. Отрицательно заряженная ДНК движется к положительному электроду. Изображение предоставлено: Genome Research Limited

Визуализация результатов

• После того, как ДНК прошла достаточно далеко по гелю, электрический ток отключается, и гель удаляется из емкости для электрофореза.
• Для визуализации ДНК гель окрашивают флуоресцентным красителем, который связывается с ДНК, и помещают на ультрафиолетовый трансиллюминатор, который показывает окрашенную ДНК в виде ярких полос.
• В качестве альтернативы краситель можно смешать с гелем перед его заливкой.
• Если гель растекся правильно, будет видна полосатая структура маркера ДНК / стандарта размера.
• После этого можно судить о размере ДНК в вашем образце, представив горизонтальную линию, проходящую поперек полос маркера ДНК. Затем вы можете оценить размер ДНК в образце, сопоставив их с ближайшей полосой в маркере.

Иллюстрация, показывающая полосы ДНК, разделенные на геле.Длину фрагментов ДНК сравнивают с маркером, содержащим фрагменты известной длины. Изображение предоставлено: Genome Research Limited

Эта страница последний раз обновлялась 25.01.2016

Электрофорез | Спросите у биолога

Электрофорез в агарозном геле

Электрофорез в агарозном геле позволяет разделять фрагменты ДНК по размеру. Как правило, молекула ДНК переваривается рестрикционными ферментами, и электрофорез в агарозном геле используется в качестве диагностического инструмента для визуализации фрагментов.Электрический ток используется для перемещения молекул ДНК через агарозный гель, который представляет собой полисахаридную матрицу, которая функционирует как своего рода сито. Матрица помогает «поймать» молекулы по мере их перемещения электрическим током.

Эта техника имеет множество применений. Вообще говоря, вы можете анализировать фрагменты ДНК, которые возникают в результате ферментативного переваривания более крупного фрагмента ДНК, чтобы визуализировать фрагменты и определить размеры фрагментов.

Помимо полезности в исследовательских методах, электрофорез в агарозном геле является распространенным методом судебной медицины и используется для снятия отпечатков пальцев ДНК.

А нельзя было просто покрасить?

Бромид этидия представляет собой интеркалирующий краситель, что означает, что он внедряется между основаниями, расположенными в центре спирали ДНК. Одна молекула бромида этидия связывается с одним основанием. Когда каждая молекула красителя связывается с основаниями, спираль разматывается, чтобы принять напряжение от красителя.

Замкнутая кольцевая ДНК ограничена и не может противостоять такому напряжению скручивания, как линейная ДНК, поэтому кольцевая ДНК не может связывать столько красителя, сколько линейная ДНК.

Бромид этидия легко проникает в ваши клетки. ДНК человека линейна и хорошо окрашивается. Это значит, что он может попасть в вашу ДНК и раскрутить ее. Это нехорошо, поэтому при использовании бромистого этидия убедитесь, что вы осторожны и защищены.

Существуют также более безопасные и менее токсичные альтернативы, которые вы можете использовать. GelRed и GelGreen — это пятна ДНК, которые не могут проходить через клеточные мембраны, что делает их более безопасными в использовании и утилизации.

Перемещение по матрице

Молекулы фосфата, составляющие основу молекул ДНК, имеют высокий отрицательный заряд. Когда ДНК помещают в поле с электрическим током, эти отрицательно заряженные молекулы ДНК мигрируют к положительному концу поля, которое в данном случае представляет собой гель агарозы, погруженный в буферную ванну.

Гель агарозы представляет собой сшитую матрицу, которая чем-то похожа на трехмерную сетку или экран. Молекулы ДНК притягиваются к положительному концу током, но они сталкиваются с сопротивлением этой агарозной сетки. Молекулы меньшего размера могут перемещаться по сетке быстрее, чем более крупные, поэтому они продвигаются по гелю дальше, чем молекулы большего размера.Вот как электрофорез в агарозе разделяет разные молекулы ДНК в зависимости от их размера. Гель окрашивают бромидом этидия, чтобы вы могли визуализировать, как эти молекулы ДНК распадаются на полосы вдоль геля.

Саузерн-блоттинг также можно использовать в качестве метода визуализации агарозных гелей.

Неизвестные образцы ДНК обычно обрабатывают в одном геле с «лестницей». Лестница — это образец ДНК, размер полос которого известен. Итак, после того, как вы закончите свой образец, вы можете сравнить неизвестные фрагменты с фрагментами лестницы и определить приблизительный размер неизвестных полос ДНК по тому, как они соответствуют известным полосам лестницы.

---

Дополнительные изображения из Викимедиа, полученные через Якопо Вертера (аппарат для электрофореза) и Мнольф (гель-электрофорез)

Что включает в себя гель-электрофорез?

Гель-электрофорез — широко используемый метод в лабораториях биологических наук для разделения макромолекул, таких как ДНК, РНК и белки. В этом методе молекулы разделяются на основе их размера и электрического заряда. Гель-электрофорез обычно проводится в лабораториях для анализа образцов ДНК, РНК или белков из различных источников.

Загрузка образцов ДНК в агарозный гель для электрофореза — изображение Авторские права: научное фото, идентификатор изображения: 214331152 через Shutterstock.com

Принципы гель-электрофореза

В методе гель-электрофореза используется различие в размере и заряде разных молекул в образце. Разделительный образец ДНК или белка наносят на пористый гель, помещенный в ионную буферную среду. При приложении электрического заряда каждая молекула, имеющая разный размер и заряд, будет двигаться через гель с разной скоростью.

Пористый гель, используемый в этой технике, действует как молекулярное сито, отделяющее более крупные молекулы от более мелких. Молекулы меньшего размера перемещаются по гелю быстрее, а более объемные остаются. Подвижность частиц также контролируется их индивидуальным электрическим зарядом. Два противоположно заряженных электрода, которые являются частью системы, притягивают молекулы к себе в зависимости от их заряда.

Как это работает?

Гель, используемый для гель-электрофореза, обычно изготавливается из материала, называемого агарозой, который представляет собой гелеобразное вещество, извлеченное из морских водорослей. Этот пористый гель можно использовать для разделения макромолекул самых разных размеров. Гель погружают в солевой буферный раствор в камере для электрофореза. Трис-борат-ЭДТА (ТВЭ) обычно используется в качестве буфера. Его основная функция — контролировать pH системы. Камера имеет два электрода — один положительный, а другой отрицательный — на двух концах.

Образцы, которые необходимо проанализировать, затем загружают в крошечные лунки геля с помощью пипетки. После завершения загрузки подается электрический ток 50–150 В.Теперь заряженные молекулы, присутствующие в образце, начинают мигрировать через гель к электродам. Отрицательно заряженные молекулы движутся к положительному электроду, а положительно заряженные молекулы — к отрицательному.

Скорость, с которой каждая молекула проходит через гель, называется ее электрофоретической подвижностью и определяется в основном ее чистым зарядом и размером. Сильно заряженные молекулы движутся быстрее, чем слабо заряженные. Меньшие молекулы бегут быстрее, оставляя большие позади. Таким образом, сильный заряд и малый размер увеличивают электрофоретическую подвижность молекулы, в то время как слабый заряд и большой размер уменьшают подвижность молекулы. Когда все молекулы в образце имеют одинаковый размер, разделение будет основываться исключительно на их размере.

После завершения разделения гель окрашивают красителем, чтобы выявить полосы разделения. Бромид этидия — флуоресцентный краситель, обычно используемый в гель-электрофорезе. Гель замачивают в разбавленном растворе бромистого этидия, а затем помещают в УФ-трансиллюминатор для визуализации полос разделения.

Полосы немедленно исследуются или фотографируются для дальнейшего использования, так как со временем они будут диффундировать в гель. Краситель также может быть загружен в гель заранее, чтобы отслеживать миграцию молекул по мере того, как это происходит.

Применение гель-электрофореза

Гель-электрофорез широко используется в лабораториях молекулярной биологии и биохимии в таких областях, как судебная медицина, консервативная биология и медицина.

Некоторые ключевые области применения этой техники перечислены ниже:

• В отделении фрагментов ДНК для дактилоскопии ДНК для расследования места преступления
• Для анализа результатов полимеразной цепной реакции
• Для анализа генов, связанных с определенным заболеванием
• В профилировании ДНК для таксономических исследований для различения различных видов
• При тестировании на отцовство с помощью снятия отпечатков ДНК
• При изучении структуры и функции белков
• В анализе устойчивости к антибиотикам
• В блоттинге для анализа макромолекул
• В исследовании эволюционных взаимоотношений путем анализа генетического сходства популяций или видов

Список литературы

Дополнительная информация

Что такое электрофорез? | Cleaver Scientific

Электрофорез — это электрокинетический процесс, при котором заряженные частицы в жидкости разделяются с помощью поля электрического заряда. Это наиболее часто используется в науках о жизни для разделения молекул белка или ДНК и может быть достигнуто с помощью нескольких различных процедур в зависимости от типа и размера молекул. Процедуры в чем-то различаются, но для всех нужен источник электрического заряда, поддерживающая среда и буферный раствор. Электрофорез используется в лабораториях для разделения молекул по размеру, плотности и чистоте.

Как это работает?

К молекулам приложено электрическое поле, и, поскольку они сами электрически заряжены, на них действует сила.Чем больше заряд молекулы, тем больше сила, приложенная электрическим полем, и, следовательно, тем дальше через поддерживающую среду молекула будет двигаться относительно своей массы.

Некоторые примеры применения электрофореза включают анализ ДНК и РНК, а также электрофорез белков, который представляет собой медицинскую процедуру, используемую для анализа и разделения молекул, обнаруженных в образце жидкости (чаще всего в образцах крови и мочи).

Виды электрофореза

В качестве поддерживающей среды для электрофореза обычно используются различные типы гелей, которые могут иметь форму пластин или трубок, в зависимости от того, что более выгодно.Гелевые пластины позволяют одновременно обрабатывать множество образцов и поэтому часто используются в лабораториях. Однако гели для пробирок дают лучшее разрешение результатов, поэтому их часто выбирают для электрофореза белков.

Агарозный гель обычно используется для электрофореза ДНК. Он имеет крупнопористую структуру, позволяющую более крупным молекулам легко перемещаться, но он не подходит для секвенирования более мелких молекул.

Электрофорез в полиакриламидном геле (PAGE) имеет более четкое разрешение, чем в агарозном геле, что делает его более подходящим для количественного анализа.Это позволяет определить, как белки связываются с ДНК. Его также можно использовать для понимания того, как бактерии становятся устойчивыми к антибиотикам, с помощью анализа плазмид.

2D-электрофорез разделяет молекулы по оси x и оси y: одна разделяет их по заряду, а другая — по размеру.

гель-электрофорез | Пути с течением времени

Гели агарозы представляют собой простой метод анализа препаратов ДНК. Молекулы ДНК имеют одинаковое отношение заряда к массе, что придает аналогичные электрофоретические свойства линейным молекулам ДНК различной длины.Мы будем использовать «молекула» для обозначения линейного фрагмента ДНК, но имейте в виду, что одна «молекула» ДНК может содержать последовательности нескольких генов или частей генов.

Агарозные гели представляют собой пористые матрицы
Несколько факторов влияют на миграцию ДНК через агарозные гели
Флуоресцентные интеркалирующие агенты используются для визуализации молекул ДНК в гелях
Стандарты используются для оценки размеров молекул ДНК

Гели агарозы представляют собой пористые матрицы

Агароза — это полисахарид, очищенный от красных водорослей или морских водорослей. Агароза более очищенная (и значительно более дорогая!), Чем агар, который получают из тех же морских водорослей. Молекулы агарозы представляют собой длинные линейные полимеры повторяющегося дисахарида D-галактозы и 3,6-ангидро-α-L-галактопиранозы (справа). Типичная молекула агарозы содержит более ста субъединиц. Агароза, используемая для электрофореза, была высокоочищенной. В процессе очистки удаляются примеси, которые могут мешать работе ферментов, используемых при молекулярном клонировании, такие как эндонуклеазы рестрикции
.В процессе также генерируется препарат агарозы с желательными электрофоретическими свойствами и минимальной фоновой флуоресценцией, что важно для визуализации молекул ДНК.

Молекулы агарозы способны образовывать гели с относительно определенным размером пор из-за химических свойств молекул агарозы. Агароза демонстрирует гистерезис — ее температура плавления выше, чем температура гелеобразования. Молекулы агарозы растворяются при температуре около 90 ° C, образуя беспорядочные клубки в растворе. Гели образуются, когда температура падает примерно до 40 ° C.По мере образования геля молекулы агарозы сначала собираются в спиральные волокна, которые затем объединяются, образуя сети суперскрученных спиралей, стабилизированных водородными связями. Размер пор, который обычно составляет от 50 до 200 нм, зависит от концентрации агарозы. По мере увеличения концентрации агарозы средний диаметр поры уменьшается.

Несколько факторов влияют на миграцию ДНК через агарозные гели

Из-за отрицательного заряда фосфатных остатков в основной цепи ДНК молекулы ДНК движутся к положительному полюсу (аноду) устройства для электрофореза.Фактическая скорость миграции молекул ДНК в конкретном эксперименте зависит от множества факторов. Некоторые из этих факторов присущи молекулам ДНК, в то время как другие факторы относятся к электрофоретическим условиям. Внутренние факторы включают длину и конформацию анализируемых молекул ДНК. В пределах определенного диапазона размеров, диктуемого условиями геля, скорость миграции линейных молекул ДНК обратно пропорциональна log ₁₀ (количество пар оснований). Миграция более структурированных молекул ДНК, таких как суперспиральные плазмиды, гораздо менее предсказуема. Скорость миграции этих более структурированных ДНК зависит от плотности спиралей, наличия зазубрин и других структурных особенностей.

На скорость миграции молекул ДНК в агарозных гелях также влияет состав геля. Скорость миграции молекулы ДНК снижается по мере увеличения концентрации агарозы в геле. Исследователи обычно регулируют концентрацию агарозы, чтобы оптимизировать разрешение молекул ДНК в пределах определенного диапазона размеров.Два буфера, обычно используемые в лабораториях, TAE (трис: ацетат: EDTA) и TBE (трис: борат: EDTA), также влияют на скорость электрофореза.

Из-за этой врожденной изменчивости исследователи ВСЕГДА включают ряд стандартов ДНК с известными размерами в тот же гель, что и анализируемые образцы. Важно отметить, что эти стандарты должны иметь аналогичную структуру (например, линейную или суперспиральную) и подвергаться тем же химическим модификациям, что и анализируемые образцы ДНК.

Флуоресцентные интеркалирующие агенты используются для визуализации молекул ДНК в гелях

Нуклеиновые кислоты визуализируются флуоресцентными красителями, которые прочно связываются с ДНК.Красители представляют собой интеркалирующие агенты, которые вставляются в спираль ДНК и в структурированные области одноцепочечных нуклеиновых кислот. Флуоресценция этих красителей увеличивается на порядок, когда они связывают нуклеиновые кислоты, поэтому фоновая флуоресценция на агарозных гелях обычно низкая. В этом классе мы будем использовать бромид этидия (EtBr) для визуализации фрагментов ДНК. EtBr поглощает свет в ультрафиолетовом (УФ) диапазоне и излучает оранжевый свет. Гели просматривают с помощью специальных трансиллюминаторов, содержащих УФ-свет.EtBr — это светочувствительное соединение, поэтому запасы хранятся в темноте.

Стандарты используются для оценки размеров молекул ДНК

На рисунке справа показана полоса от окрашенного EtBr 1% агарозного геля, содержащего стандарты размера ДНК. Лестница размером 1 т.п.н., показанная в этом студенческом геле, представляет собой запатентованную смесь линейных фрагментов ДНК размером от 0,5 до 10 килобаз (т.п.н.). Интенсивность окрашивания полос на агарозном геле отражает количество ДНК в полосе, поскольку EtBr интеркалирует довольно равномерно по длине линейных молекул ДНК.Как видите, эта конкретная смесь содержит одинаковые количества каждого фрагмента ДНК, за исключением фрагмента размером 3 т.п.н., который содержит на ~ 2,5 больше ДНК, чем другие фрагменты. Более высокая интенсивность фрагмента размером 3 т.п.н. служит полезным маркером ориентации в ситуациях, когда более мелкие фрагменты могли выходить за пределы конца геля или когда некоторые маркеры плохо отделяются друг от друга. (Это обычное дело!)

Обратите внимание, что самые короткие молекулы на геле лучше отделены друг от друга, чем более длинные молекулы.Продукты ПЦР, которые вы будете анализировать в этой лаборатории, в основном находятся в диапазоне 400–1000 пар оснований. Чтобы увеличить разрешение этих молекул, мы будем использовать 1,25% гели агарозы. (Это снизит разрешение более крупных молекул ДНК). Также обратите внимание, что меньшие полосы кажутся более размытыми на окрашенном геле, потому что на них больше влияет случайная диффузия, поскольку они мигрировали через сеть полимеров агарозы.

Вернуться к началу

Гель-электрофорез нуклеиновой кислоты

— краткий обзор и история | Thermo Fisher Scientific

Гель-электрофорез — это распространенный лабораторный метод в молекулярной биологии для идентификации, количественного определения и очистки нуклеиновых кислот.Благодаря своей скорости, простоте и универсальности этот метод широко используется для разделения и анализа нуклеиновых кислот. Используя гель-электрофорез, нуклеиновые кислоты в диапазоне приблизительно 0,1-25 т.п.н. могут быть разделены для анализа в течение нескольких минут или часов, а разделенные нуклеиновые кислоты могут быть извлечены из гелей с относительно высокой чистотой и эффективностью [1,2].

Этот метод включает приложение электрического поля к смесям заряженных молекул, чтобы заставить их мигрировать в зависимости от размера, заряда и структуры через гелевую матрицу.Фосфатные группы рибозо-фосфатных основных цепей нуклеиновых кислот заряжены отрицательно при pH от нейтрального до основного (, рис. 1A, ). Таким образом, каждый нуклеотид несет чистый отрицательный заряд, то есть общий заряд молекулы нуклеиновой кислоты пропорционален общему количеству нуклеотидов или ее массе. Другими словами, молекулы ДНК или РНК несут постоянное отношение заряда к массе. В результате их подвижность при гель-электрофорезе определяется в основном на основе размера, когда они имеют сопоставимую структуру (узнайте больше о том, как структура нуклеиновой кислоты влияет на миграцию).Следовательно, под воздействием электрического поля нуклеиновые кислоты мигрируют от отрицательного электрода (катода) к положительному электроду (аноду), причем более короткие фрагменты перемещаются быстрее, чем более длинные, что приводит к разделению в зависимости от размера ( Рисунок 1B ).

Рис. 1. (A) Чистые отрицательные заряды, переносимые цепью нуклеиновой кислоты. (B) Разделение фрагментов нуклеиновой кислоты различной длины в гель-электрофорезе.

Кроме того, расстояния миграции нуклеиновых кислот при гель-электрофорезе обычно показывают предсказуемую корреляцию с их размерами, что позволяет рассчитать размер нуклеиновых кислот в данном образце. Для линейных двухцепочечных фрагментов ДНК расстояние миграции обратно пропорционально логарифму молекулярной массы в определенном диапазоне (, рис. 2А, ) [3]. Для приблизительного определения размера расстояния миграции обычно сравнивают с образцами, содержащими молекулы известных размеров (стандарты молекулярной массы, иногда называемые «лестницами»), которые часто включают в прогон геля.Широко принятая модель подвижности нуклеиновых кислот через гель — это «смещенная рептация» — миграция, смещенная в сторону приложенной электрической силы и включающая извилистое движение, когда передний край тянет за собой все остальное ( Рисунок 2B, ) [4,5]. Эта модель была визуализирована с помощью флуоресцентной микроскопии [6].

Рисунок 2. Подвижность нуклеиновых кислот при гель-электрофорезе. (A) Корреляция размера и миграции линейных двухцепочечных фрагментов ДНК. (B) Модель предвзятого репортажа.

Верх

Использование электрофореза для разделения нуклеиновых кислот началось в начале 1960-х годов. В то время нуклеиновые кислоты обычно фракционировали центрифугированием в градиенте плотности на основе скоростей седиментации, которые определяются размером и конформацией нуклеиновых кислот. Центрифугирование в градиенте плотности потребовало значительного времени, тяжелого оборудования и большого количества образцов.В качестве альтернативы исследователи начали изучать характеристики подвижности ДНК в ионных или электролитических растворах при приложении электрического поля — процесс, названный электрофорезом [7,8].

В течение нескольких лет электрофорез нуклеиновых кислот превратился в использование гелевой матрицы в качестве среды для разделения, заимствуя технику, уже применяемую в электрофорезе белков. Агар (природный углевод), агароза (компонент агара), полиакриламид (синтетический гель) и составные гели агароза-акриламид оказались успешными в качестве матриц для электрофореза ДНК и РНК в середине-конце 1960-х годов [ 9-11].Результаты фракционирования из этих ранних экспериментов по гель-электрофорезу показали корреляцию с коэффициентами седиментации или значениями S , полученными центрифугированием в градиенте плотности, установленным в то время методом разделения нуклеиновых кислот. С лучшим пониманием и прогрессом в производстве агарозы в конце 1960-х годов агароза постепенно заменила агар в качестве предпочтительной среды для гель-электрофореза [12].

Рисунок 3.Хронология раннего развития гель-электрофореза нуклеиновых кислот.

В 1970-х годах использование гель-электрофореза для разделения и анализа нуклеиновых кислот стало более распространенным с открытием рестрикционных ферментов и их применением в технологии рекомбинантных ДНК. Центрифугирование в градиенте плотности сахарозы, распространенный метод разделения в то время, включало громоздкие процессы и не могло адекватно отличить фрагменты ДНК аналогичного размера от рестрикционного переваривания.Вязкость раствора была использована эмпирически как индикатор успеха рестрикционного переваривания, так как расщепление ДНК от более крупных фрагментов к более мелким приводит к получению менее вязких растворов [13]. Клонирование фрагментов ДНК произвело революцию в 1971 году, когда Данна и Натанс впервые сообщили о калибровке рестрикционно-переваренных фрагментов ДНК SV40 с помощью электрофореза в полиакриламидном геле [14]. Хотя агарозный и агарозо-полиакриламидный гели использовались для разделения РНК и одноцепочечной ДНК в конце 1960-х годов [15,16], работа по анализу рестрикционно-переваренных фрагментов с помощью электрофореза в агарозном геле s не была опубликована до 1973 года ( Рисунок 3 ) [17,18].

1970-е годы также стали прорывом в способах обнаружения нуклеиновых кислот в гель-электрофорезе. Ранние методы электрофореза основывались на радиоактивной маркировке нуклеиновых кислот для визуализации разделенных молекул. Несмотря на высокую чувствительность, протоколы радиоактивной маркировки длинны и требуют обучения в области радиационной безопасности. В 1972 году две лаборатории независимо друг от друга описали окрашивание геля флуоресцентной молекулой бромистого этидия (EtBr), которое стало распространенным и более простым методом обнаружения нуклеиновых кислот с чувствительностью в несколько нанограмм двухцепочечной ДНК [19-21].Сегодня доступны флуоресцентные красители, которые более безопасны, чувствительны и специфичны, чем EtBr, улучшая обнаружение нуклеиновых кислот после гель-электрофореза.

Как и с появлением EtBr, гель-электрофорез стал более полезным с появлением «пластинчатых» гелей примерно в 1970 году, что привело к появлению вездесущего оборудования, которое мы видим сегодня. Ранее исследования с помощью гель-электрофореза проводились с использованием гелей для пробирок , отлитых в стеклянные пробирки диаметром 1–3 мм. Это был метод с очень низкой производительностью, поскольку каждая пробирка могла вместить только один образец (, рис. 4A, ). Вертикальные гели для пластин (, рис. 4B, ), которые были намного проще в приготовлении и позволяли проводить одновременный анализ большего количества образцов, были впервые введены для полиакриламида в конце 1960-х и усовершенствованы Studier в начале 1970-х [22-24] . Горизонтальные плоские гели для агарозы ( фиг. 4C, ), аналогичные формату, используемому до сих пор, были впервые описаны McDonell et al. в 1977 г. [25]. Сегодня мини-сборные, готовые к использованию гели доступны как в полиакриламиде, так и в агарозе для более безопасного, быстрого и простого электрофореза в геле.Кроме того, в некоторых системах для гель-электрофореза используются готовые безбуферные гели, которые можно запустить всего за 10 минут. Их также можно комбинировать с цифровым изображением и анализом разделенных нуклеиновых кислот для более эффективного и удобного рабочего процесса.

Рис. 4. Распространенные форматы гелей для электрофореза.

В целом, гель-электрофорез стал универсальным методом в молекулярной биологии для разделения нуклеиновых кислот.Этот аналитический и препаративный метод не только является неотъемлемой частью обычных рабочих процессов, таких как молекулярное клонирование и ПЦР, но также играет важную роль для разделения и анализа нуклеиновых кислот в новых технологиях, таких как редактирование генома и секвенирование следующего поколения.

Верх

Руководство по поиску и устранению неисправностей при электрофорезе нуклеиновых кислот

| Thermo Fisher Scientific

Возможные причины	Рекомендации
Гелевый препарат
Густой гель	Сохраняйте толщину геля около 3–4 мм при заливке горизонтальных агарозных гелей. Гели толщиной более 5 мм могут привести к диффузии полос во время электрофореза.
Плохо сформированные скважины	Тщательно очистите гребешок для геля, прежде чем использовать его для заливки геля. Во избежание протекания пробы через дно геля и размазывания полос пробы не проталкивайте гребешок до дна горизонтального геля. Избегайте переполнения лотка для геля, так как это может привести к подключению лунок. Прежде чем снимать гребешок, дайте ему сформироваться лункам. Когда гель затвердеет, осторожно и постепенно снимите гребешок, чтобы не повредить лунки.
Неправильный тип геля	Для электрофореза одноцепочечных нуклеиновых кислот (например, РНК) приготовьте денатурирующий гель для эффективного разделения. С другой стороны, избегайте использования денатурирующих гелей с образцами двухцепочечной ДНК.
Пробоподготовка
Образец перегружен	Используйте не более необходимого количества образцов для гель-электрофореза; Обычно рекомендуется 0,1–0,2 мкг образца на миллиметр ширины лунки геля. Расплывчатые мазки, деформированные или U-образные полосы и полосы, которые кажутся сросшимися, являются обычными характеристиками перегруженных гелей.
Образец деградирован	Убедитесь, что выбранные реагенты соответствуют требованиям молекулярной биологии и что лабораторное оборудование не содержит нуклеаз.Соблюдайте надлежащие лабораторные практики (например, используйте перчатки, предотвращайте заражение нуклеазами, работайте в специально отведенных местах и ​​т. Д.) При работе с нуклеиновыми кислотами, особенно при работе с РНК.
Образец в высокосолевом буфере	Убедитесь, что концентрация соли загрузочного буфера совместима с выбранным гелем. При необходимости разбавьте загрузочный буфер. Если образец нуклеиновой кислоты уже находится в буфере с высоким содержанием соли, разбавьте образец водой, свободной от нуклеаз, перед добавлением загрузочного буфера.При необходимости очистите или осаждайте образец нуклеиновой кислоты и ресуспендируйте его в воде, свободной от нуклеаз, для удаления избытка соли.
Образец, содержащий большое количество белка
Несовместимый буфер загрузки	Для электрофореза одноцепочечных нуклеиновых кислот используйте краситель, содержащий денатурант, а затем нагрейте образец, чтобы предотвратить образование нежелательных дуплексов. Для электрофореза двухцепочечной ДНК избегайте загрузки красителя денатурантом и не нагревайте образец, чтобы сохранить дуплексную структуру.
Гель
Пузыри, появившиеся во время загрузки образца	Убедитесь, что во время загрузки образца в лунку не попали пузырьки воздуха, чтобы избежать искажения полосы.
Скважина повреждена при загрузке образца	Избегайте прокалывания лунок кончиками пипеток во время загрузки образца.
Лунки для образцов, содержащие остаточный акриламид и / или мочевину	При использовании полиакриламидных гелей смывайте остаточный акриламид (и мочевину, в случае денатурирующих гелей) из лунок перед загрузкой образца.
Очень низкое или высокое напряжение	Подайте напряжение в соответствии с рекомендациями для диапазона размеров нуклеиновых кислот и используемого рабочего буфера.Очень низкое или высокое напряжение может привести к неоптимальному разрешению при разделении нуклеиновых кислот.
Очень короткое или долгое время работы	Нанесите гель на достаточно долгое время, чтобы полосы полностью рассосались. Однако очень длительная проба может вызвать чрезмерное нагревание, денатурировать образцы и вызвать диффузию полос.
Несовместимый рабочий буфер	Убедитесь, что буфер для приготовления геля и рабочий буфер совместимы и приготовлены правильно. Используйте буфер с высокой буферной емкостью для электрофореза более 2 часов.
Образец визуализации
Ленточная диффузия	Избегайте хранения геля или большой задержки между завершением электрофореза и визуализацией геля. Полосы меньшего размера молекул, а также окрашивание нуклеиновой кислоты, включенное в гель, могут стать диффузными.
Совместно мигрирующие ленты	Используйте соответствующий процент геля, напряжение и время анализа для разделения полос с одинаковыми размерами молекул. No related posts. Добавить комментарий Отменить ответ Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены * Комментарий * Имя * Email * Сайт