Главная » Лабораторная и функциональная диагностика » ПЦР-анализ

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – молекулярно-биологический метод исследования, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой фрагмент ДНК, содержащий специфическую генетическую информацию любого организма среди огромного количества другой ДНК и многократно размножить искомый фрагмент в случае, если он действительно присутствует в исследуемом материале. При ПЦР-диагностике размножению подвергается не бактерия, а только ее ДНК, причем не вся молекула ДНК, а только строго специфическая нуклеотидная последовательность, имеющаяся лишь у данного возбудителя.

Содержание:

ПЦР-анализ на комплекс исследований на заболевания, передающиеся половым путем (ЗППП)

Исследуемый материал: соскоб со слизистых оболочек урогенитального тракта или соскоб из зева, мокрота, промывные воды бронхов, клеточный осадок мочи.

Подготовка. Полученный материал поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.

3а 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Одна из основных причин воспалительных заболеваний урогенитального тракта – инфекции, возбудители которых передаются половым путем (ИППП), представляющие собой достаточно разнообразную группу микроорганизмов. За развитием клинического синдрома могут стоять разные возбудители ИППП. Помимо отсутствия специфических клинических признаков, на основании которых можно установить этиологию заболевания, существенную проблему представляют полимикробные ассоциации, включающие представителей патогенной и условнопатогенной флоры, составляющих, по крайней мере, половину случаев ИППП. Современные эпидемиологические данные показывают, что уретриты у мужчин наиболее часто ассоциированы с Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium и Ureaplasma spp. (Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum). Эти же возбудители вызывают воспалительные процессы у женщин.

ПЦР-анализ на хламидиоз

Исследуемый материал: соскоб урогенитальный или соскоб из зева, конъюнктивы, мокрота, промывные воды бронхов, синовиальная жидкость.

Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.

3а 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Возбудитель урогенитального хламидиоза – Chlamydia trachomatis – облигатный внутриклеточный паразит со сложным циклом развития. C. trachomatis имеет строгую специфичность в отношении цилиндрического эпителия цервикального канала, уретры и прямой кишки. Инкубационный период хламидийной инфекции составляет от 5 до 30 дней. Клиническая картина зависит от места поражения, времени с момента инфицирования и выраженности реакций макроорганизма. Из заболеваний, которые хламидии способны вызывать у мужчин, чаще всего встречаются уретрит и его осложнения: эпидидимит и простатит. Для женщин хламидийная инфекция представляет наибольшую угрозу изза слабо выраженной симптоматики и связанными с этим поздней диагностикой и несвоевременным назначением лечения. У женщин урогенитальная хламидийная инфекция может долгое время протекать с минимальными клиническими проявлениями, приводя к развитию восходящей инфекции с поражением органов малого таза. У них хламидийная инфекция чаще всего является причиной развития цервицита, а его осложнениями являются сальпингит и сальпингоофорит. У новорожденных, рожденных от матерей, больных урогенитальным хламидиозом, может развиваться хламидийный конъюнктивит, уретрит, вульвовагинит, артрит, пневмония и поражения других органов.

Обследование на наличие хламидий даже при отсутствии симптомов заболевания рекомендуется проводить лицам, входящим в группы риска, в том числе сексуально активным девушкамподросткам, особо подверженным заражению хламидийной инфекцией, если они часто меняют половых партнеров и не пользуются барьерными контрацептивами. Целесообразно также ежегодно проводить обследование женщин детородного возраста, особенно тех, кто использует гормональные контрацептивные средства, меняет половых партнеров, в анамнезе которых имеются указания на внематочную беременность и воспалительные заболевания органов малого таза.

Хламидии не относятся к нормальной микрофлоре человека, их обнаружение говорит о наличии инфекционного процесса.

ПЦР-анализ на туберкулез

Исследуемый материал: кровь, соскоб, моча, биоптат, мокрота, смывы, плевральный выпот, секционный материал, спинномозговая жидкость. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую 0,2 мл жидкость поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Туберкулёз, вопреки распространённому мнению, болезнь не только органов дыхания. Микобактерии могут разноситься с кровью и способны поражать практически все органы и системы. ПЦРисследование на туберкулез является экспресс – диагностикой, позволяющей выявлять различные формы туберкулеза, которые трудно диагностируются другими лабораторными методами. Показаниями к назначению анализа может быть лихорадка, характеризующаяся ежедневным двойным повышением и понижением температуры тела, острые воспалительные заболевания верхних и нижних дыхательных путей с длительным контактом с туберкулезным больным в анамнезе. Положительная реакция на туберкулиновую пробу (гиперчувствительность или анергия) на фоне обострения какоголибо системного заболевания, подозрение на системную волчанку.

ПЦР – диагностика туберкулеза различных локализаций позволяет диагностировать активный туберкулез в несколько раз быстрее, чем бактериоскопический и бактериологический методы. С другой стороны, с помощью ПЦР можно осуществлять эпидемиологический контроль за бактериовыделителями, и тем самым индивидуально решать вопросы продолжения антибактериального лечения, несмотря на кажущуюся клиникорентгенологическую стабилизацию специфического процесса.

Материалами для анализа могут служить мокрота, бронхоальвеолярный лаваж, спинномозговая жидкость, экссудаты, моча и пр., что позволяет эффективно выявлять как легочные, так и внелегочные формы инфекции.

ПЦР-анализ на гепатит С

Исследуемый материал: кровь с ЭДТА, биоптат. Забор крови осуществляется в пробирку антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3 поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл.

Основной путь заражения вирусом контакт с инфицированной кровью. Реже вирус передается половым путем. В группы риска входят: наркоманы, применяющие внутривенное введение наркотических веществ; лица, которым проводилось переливание крови; больные на гемодиализе (аппарат «искусственная почка»); лица, имеющие множественные незащищенные половые контакты; дети, рожденные от матерей – носителей вируса. Однако путь инфицирования возможно проследить не всегда. Заразиться можно и у стоматолога, и при выполнении пирсинга или татуировки в нестерильных условиях. Изза особенностей вируса, «скрывающегося» от иммунной системы, острый гепатит переходит в хроническую форму у 8085% заболевших. При этом острый гепатит часто протекает скрыто и поэтому не распознается.

Обнаружение в сыворотке крови РНК HCV является свидетельством продолжающейся репликации HCV. В острой фазе гепатита РНК выявляется в крови уже через одну–две недели после заражения, т.е. задолго до появления антител antiHCV. По рекомендации ВОЗ, установление диагноза гепатита "С" возможно на основании троекратного обнаружения HCV РНК в сыворотке крови больного при отсутствии других маркеров гепатита.

ПЦР-анализ на микоплазма гоминис

Исследуемый материал: мазок урогенитальный или мазок из зева, мокрота, промывные воды бронхов.

Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.

3а 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Микоплазмоз – заболевание, передающееся половым путем, вызванное микоплазмой. Не всегда наличие микоплазмы гоминис ведёт к развитию заболевания. Микоплазма гоминис может входить в естественную биологическую среду мочеполовых путей и способна вызывать заболевания лишь при определённых условиях. Необходимость ее лечения может определить только врач.

Урогенитальный микоплазмоз обычно никак себя не проявляет, и диагностировать его можно только лабораторно.

ПЦР-анализ на трихомониаз

Исследуемый материал: мазок урогенитальный или мазок из зева, мокрота, промывные воды бронхов.

Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.

3а 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 1015 мл.

Трихомониаз (трихомоноз) – заболевание мочеполового тракта, возбудителем которого является трихомонада (Trichomonas vaginalis). В последнее время трихомониаз получил широкое распространение.

Проникновение трихомонад происходит через межклеточные пространства или лимфатические щели. В уретре они закрепляются в клетках слизистой оболочки, вызывая воспаление. Заражение трихомониазом происходит в основном половым путем, бытовым путем (в бассейне, реке, в душе) заразиться практически невозможно. Однако в сперме, моче и воде возбудитель остается жизнеспособным в течение 24 часов. У больных или у тех, кто перенес эту инфекцию, вырабатываются сывороточные и секреторные антитела, которые указывают на возбудителя, но иммунитета на трихомонадную инфекцию у них не развивается. Диагностика трихомониаза осуществляется на основании клинических признаков и лабораторных исследований. Для получения более точного результата применяется одновременно несколько методов, а материал для изучения берется из разных очагов воспаления.

ПЦР-анализ на гепатит В

Исследуемый материал: кровь с ЭДТА, биоптат. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3 поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл.

Вирус гепатита В считается наиболее изученным среди остальных вирусов гепатита. Однако в последнее десятилетие его генетическая изменчивость стала оказывать значительное влияние на течение и исход болезни.

Основным маркером инфицирования вирусом гепатита В является HBsAg. Однако в настоящее время накоплены данные о возможности существования «скрытой» HBsAg негативной ВГВинфекции. Часть случаев такой инфекции обусловлена наличием «ускользающего» варианта вируса, при котором не детектируются никакие маркеры вируса, но присутствует вирусная ДНК. Мутации в вирусном геноме, коинфицирование, а также начало или окончание инфекционного процесса могут сопровождаться снижением концентрации HBsAg в сыворотке крови до уровня ниже предела чувствительности большинства тестсистем. В этих случаях ПЦР диагностика является единственным диагностическим методом выявления мутантных агентов.

ПЦР-анализ на уреаплазму

Исследуемый материал: мазок урогенитальный или мазок из зева, мокрота, промывные воды бронхов.

Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.

За 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Уреаплазмоз – заболевание, вызываемое уреаплазмой (Ureaplasma urealyticum). Очень часто уреаплазмоз рассматривают вместе с микоплазмозом. Оба эти микроорганизма занимают промежуточное положение между вирусами и бактериями, относятся к внутриклеточным микробам и передаются половым путем. Клиническая роль уреаплазм до сих пор остается предметом жарких дискуссий. Трудности доказательства этиологической роли уреаплазм заключаются в их широкой распространенности среди клинически здоровых лиц, в связи с чем проводится поиск диагностических маркеров, позволяющих отличить здоровое носительство от инфекции. Достоверным патологическим маркером уреаплазм является плотность обсемененности или бактериальная нагрузка, оцениваемые при бактериологическом посеве и выражающиеся в значениях цветоизменяющих единиц на 1 мл (ЦОЕ/мл). Среди врачейклиницистов сегодня сформировался определенный стереотип, согласно которому существует клинически значимый титр – более 104 ЦОЕ/мл, при котором необходимо назначать лечение, и состояние, оцениваемое как носительство, если концентрация микроорганизма находится в пределах 103 ЦОЕ/мл.

ПЦР-анализ на папиллому (ВПЧ с определением онкогенности)

Исследуемый материал: мазок урогенитальный, биоптаты.

Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл.

При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи. За 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Вирусы папилломы человека (ВПЧ) являются широко распространенной и гетерогенной группой вирусов. ВПЧ имеют кольцевой ДНК содержащий геном размером порядка 8 тысяч пар оснований. Таксономически вирусы папилломы делятся на роды (обозначаются греческими буквами (a, b, g и т.д.), виды (обозначаются арабскими цифрами и буквой рода), например a7, a9, b1 и др.), типы (обозначаются арабскими цифрами, например, 16, 18, 6, 11 и др.). Эпидемиологически выделяют «кожные», тропные к ороговевающему эпителию типы (в основном роды b и g), и слизистые, или аногенитальные (тропные к слизистым оболочкам), типы вируса (род a). Среди последних выделяют подгруппы низкого (в основном виды a1, a8, a10) и высокого канцерогенных рисков (виды a5, a6, a7, a9) по их способности или неспособности оказывать трансформирующее воздействие на клетки эпителия. Эпидемиологическими исследованиями последних лет показано, что к группе высокого риска принадлежат типы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73 и 82. Типы 26, 53 и 66 относятся к категории предположительно высокого риска. К группе низкого риска принадлежат типы 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 72, 81. Остальные типы относятся к категории неустановленного риска и чаще всего не ассоциированы с развитием патологий.

Типы ВПЧ как высокого, так и низкого рисков способны оказывать продуктивное воздействие на клетки эпителия, приводя к развитию классических проявлений папилломовирусной инфекции – остроконечных кондилом гениталий – и дисплазий легкой степени (LSIL или CIN1). Типы высокого онкогенного риска отличает способность оказывать трансформирующее воздействие на эпителиоциты, приводя к развитию предрака (дисплазии средней и высокой степени тяжести, HSIL или CIN2,3) и рака. Следует подчеркнуть, что развитие дисплазий не обязательно сопровождается появлением остроконечных кондилом.

Генитальный ВПЧ поражает слизистые оболочки, передается при половом контакте или новорожденному от инфицированной матери при прохождении через родовые пути. В клинической практике очень важна ранняя диагностика заболевания.

ПЦР-анализ на гонорею

Исследуемый материал: соскоб урогенитальный или из конъюнктивы.

Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.

3а 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Гонорея – инфекционное заболевание, передаваемое половым путем, возбудителем которого является гонококк (Neisseria gonorrhoeae). Гонореей наиболее часто страдают лица 20–30 лет. В большинстве случаев заражение происходит при половом контакте (вагинальном, анальном, оральном). Как правило, источником заражения бывают женщины, т.к. заболевание у них может протекать бессимптомно и трудно диагностируется. Бытовое заражение (через белье, полотенце, мочалку, посуду, воду в бассейне) встречается крайне редко, т.к. гонококковая инфекция не может существовать вне организма человека. Более того, бытовой способ заражения не дает возможности необходимому количеству гонококков попасть в организм. При этом заболевании поражаются слизистые мочеиспускательного и цервикального каналов, что приводит у женщин к воспалению шейки матки, а у мужчин к нарушению мочеиспускания. Независимо от пола длительное течение гонореи без соответствующего лечения приводит к бесплодию. Возможно заражение новорожденного от больной матери в процессе родов. У детей, зараженных во время родов гонококком, поражаются глаза, что может приводить к слепоте.

Neisseria gonorrhoeae является абсолютным патогеном, поэтому обнаружение этого возбудителя в биологическом материале свидетельствует о наличии инфекционного процесса и требует назначения лечения. Симптомы заболевания появляются на 3–5 сутки с момента заражения. У женщин появляются желтоватобелые выделения, боль внизу живота и межменструальные кровотечения, однако возможно и полное отсутствие какихлибо симптомов. У мужчин первичной формой инфекции является гонорейный уретрит, для которого характерны зуд и жжение наружного отверстия мочеиспускательного канала, которые усиливаются при мочеиспускании. Далее начинаются обильные гнойные выделения, а также сильное покраснение и отек наружного отверстия уретры. Все половые партнеры больного гонореей должны пройти обследование, а в случае необходимости, и лечение. Подтвердить отсутствие гонококковой инфекции можно только лабораторно. В Российской Федерации регламентированными методами диагностики гонококковой инфекции являются микроскопия (МС) окрашенного по Грамму препарата и бактериологический посев (БП), однако многочисленные зарубежные исследования показали, что диагностическая чувствительность указанных методов уступает современным молекулярнобиологическим тестам, основанным на методах амплификации нуклеиновых кислот (ПЦР).

ПЦР-анализ на гепатит С количественный

Исследуемый материал: кровь с ЭДТА. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Наиболее информативным параметром отклика пациента на терапию является уровень вирусной нагрузки. Ее понижение в случае проводимой терапии является явным маркером того, что пациент хорошо реагирует на выбранные лекарственные препараты и их дозу. В случае, если проводимая терапия не дает результата и в течение 3х месяцев не происходит значимого уменьшения уровня вирусной нагрузки (в 100 и более раз), обычно рекомендуется увеличение дозы или смена препарата и схемы лечения.

Количественное определение РНК вируса гепатита С в плазме крови является абсолютно необходимым исследованием при мониторинге течения заболевания и проводимой терапии. Наблюдение уровня виремии во время лечения позволяет врачам более информировано вести пациента, что в свою очередь повышает вероятность благоприятного ответа.

Обнаружение в сыворотке крови РНК HCV является "золотым стандартом" диагностики, свидетельствующим о продолжающейся репликации HCV.

ПЦР-анализ на микоплазму гениталиум

Исследуемый материал: мазок урогенитальный, моча, секрет предстательной железы, сперма, синовиальная жидкость. Чаще всего материалом для исследования является соскоб из урогенитального тракта (у женщин из цервикального канала, у мужчин – из уретры), при выборе другого биоматериала, проконсультируйтесь с врачом. У детей: у девочек берут соскоб с вульвы, у мальчиков – мочу.

Соскоб поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять провокации (кроме химических).

Исследуемый материал должен быть без примесей крови и слизи.

3а 3–5 суток до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

M. genitalium (класс молликуты) – самый мелкий из известных в природе свободно живущих микроорганизмов, размер его генома составляет 580 тыс.п. оснований, является паразитом человека, колонизирующим слизистые оболочки урогенитального тракта и вызывающим развитие воспалительных процессов. M. genitalium вызывает слизистогнойный цервицит в отсутствие N. gonorrhoeae и C. trachomatis. При этом клинические проявления цервицита, вызванного M. genitalium, практически не отличаются от цервицита хламидийной этиологии. Кроме того, было показана связь M. genitalium с воспалительными заболеваниями верхних отделов органов репродукции женщин. M.genitalium была обнаружена в биопсийном материале трубного эпителия при остром сальпингите у женщин. Инфицирование M. genitalium слизистой эндометрия сопровождается клинической и морфологической картиной острого эндометрита.

У мужчин M. genitalium является этиологическим агентом острого и хронического уретрита, при этом, в отличие от уреаплазм, практически не встречается у здоровых людей. Более того, уретрит, вызванный M. genitalium, протекает в манифестной форме чаще, чем хламидийный уретрит. По данным разных авторов доля уретритов, вызванных M. genitalium, составляет от 10 до 25 %.

Диагностика M. genitalium невозможна с использованием методов, традиционно применяемых для выявления других возбудителей ИППП – микроскопии, вследствие чрезвычайно малых размеров возбудителя; бактериологического посева, вследствие низкой скорости деления клеток микоплазм и высоких требований к составу сред; ИФА, вследствие того, что M. genitalium обладает низкими иммуногенными свойствами, а кроме того несет родовые антигены, встречающиеся у других представителей молликут, колонизирующих человеческий организм. В связи с этим единственными доступными методами лабораторной диагностики инфекции, вызванной M. genitalium, являются методы амплификации нуклеиновых кислот

В отличие от других микоплазм и уреаплазм, M. genitalium практически не встречается среди клинически здоровых лиц. В настоящее время M. genitalium рассматривается, как безусловнопатогенный микроорганизм, являющийся самостоятельным этиологическим агентом воспалительных заболеваний органов репродукции человека.

ПЦР-анализ на цитомегаловирус

Исследуемый материал: кровь, соскобы (мазки) со слизистых оболочек урогенитального тракта, осадок клеток первой порции утренней мочи, биоптаты внутренних органов, мокрота, спинномозговая жидкость, слюна, грудное молоко, бронхоальвеолярный лаваж. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Возбудитель цитомегаловирусной инфекции (ЦВМ) принадлежит к семейству герпесвирусов 5го типа. Вирус имеет сродство к ткани слюнных желез и при локализованных формах обнаруживается в этих железах. Заражение цитомегаловирусом происходит в быту: воздушнокапельным и контактным путем, половым путем, при переливании крови и трансплантации донорских органов, трансплацентарным путем, инфицированием ребенка в послеродовом периоде через грудное молоко от больной матери.

Наиболее часто ЦМВинфекция проявляется как: ОРВИ, бронхиты, "беспричинные" пневмонии, плохо поддающиеся антибиотикотерапии. В этом случае больные жалуются на слабость, общее недомогание, быструю утомляемость, головные боли, насморк, воспаление и увеличение слюнных желез, с обильным отделением слюны и белесоватыми налетами на деснах и языке. Генерализованная форма ЦМВинфекции с поражением внутренних (паренхиматозных) органов. Наблюдается воспаление печеночной ткани, надпочечников, селезенки, поджелудочной железы, почек. Поражение органов мочеполовой системы у мужчин и женщин проявляется симптомами хронического неспецифического воспаления.

Нередки поражение сосудов глаза, стенок кишечника, головного мозга и периферических нервов.

Патология беременности, плода и новорожденного: вероятность заражения ребенка цитомегаловирусом достаточно высока, если инфицирование матери произошло во время беременности. Однако наступление беременности с уже имеющейся латентной инфекцией не всегда приводит к заражению плода. У таких женщин заражение плода может произойти только при обострении латентной инфекции с развитием вирусемии. ЦМВ – инфекция новорожденных может стать причиной желтухи, увеличения печени и селезенки, кровоизлияний во внутренние органы, различных симптомов поражения нервной системы.

Возбудитель цитомегаловируса Cytomegalovirus hominis, попадая в организм один раз, остается там навсегда.

ПЦР-анализ на вирус Эпштейн-Барра

Исследуемый материал: кровь, соскоб, мазок, моча, биоптат, мокрота, спинномозговая жидкость. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Вирус ЭпштейнаБарр (EBV) принадлежит к семейству герпесвирусов 4 (Human herpesvirus HHV 4). EBV — острое вирусное заболевание, характеризующееся лихорадкой, поражением зева, лимфатических узлов, печени, селезенки и своеобразными изменениями состава крови. Относится к ДНКсодержащим лимфопролиферативным вирусам. Вирус ЭпштейнаБарр является причиной инфекционного мононуклеоза, гепатита, волосистой лейкоплакии, синдрома Стивенса – Джонсона. С ним также связывают развитие лимфомы Беркитта – рака лимфоузлов и носоглотки и Лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина). ЭБВ может быть маркером имеющегося первичного иммунодефицита.

Источником инфекции являются больной человек, в том числе со стертыми формами болезни, и вирусоноситель. Возбудитель передается воздушнокапельным путем, возможен контактный, алиментарный и трансфузионный пути передачи.

ПЦР-анализ на вирус герпеса I-го и II-го типов

Исследуемый материал: кровь, соскоб, мазок, моча, биоптат, мокрота, отделяемое везикул (пузырьковых высыпаний), спинномозговая жидкость. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Вирус герпеса I-го типа практически идентичен вирусу герпеса 2-го типа. Тип болезни – генитальный герпес, или так называемая «простуда» на губах – зависит не от типа самого вируса (ВПГI или ВПГII), который находится в организме человека, а от того места, где он проживает. В большинстве случаев (80–85%) половой герпес вызван вирусом герпеса II типа (ВПГII). В 15–20% генитальный герпес вызван вирусом герпеса I типа (ВПГI). После инфицирования вирус попадает в "депо". Если речь идет о «простуде» на губах, то этим депо становится тройничный ганглий, который расположен в полости черепа – «верхнее депо». Во время рецидива вирус выходит по нервам от тройничного ганглия, идет к коже лица, подбородка, ушей, лба, слизистой рта и десен, губ и т.д. В этих местах и возможны рецидивы. При генитальном герпесе «депо» вируса находится в крестовых ганглиях – «нижнее депо» вируса. При рецидиве вирус по нервам от крестцового ганглия спускается к коже гениталий, ягодиц, бедер, лобка, слизистой влагалища, уретры. Внутри организма человека переход вируса из «верхнего депо» в «нижнее» невозможен.

Учитывая, что симптоматика герпеса может быть схожа с симптоматикой других инфекций, передающихся половым путем, одной из главных задач является идентификация заболевания. Для диагностики ВПГ используют следующие методы исследования: полимеразная цепная реакция (ПЦР), выявление антигенов ВПГ.

Путь заражения: половой, воздушнокапельный (очень редко), при первичной инфекции возможна передача вируса через плаценту. С помощью ПЦР можно определить, Iм или IIм типом вируса произошло заражение.

ПЦР-анализ на вирус герпеса 6-го типа

Исследуемый материал: кровь, соскоб, мазок, моча, биоптат, мокрота, спинномозговая жидкость. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

В середине 80-х годов группа герпесвирусов пополнилась вирусом герпеса человека 6-го типа. Он был выделен из лимфоцитов крови больных, в связи с чем получил название лимфотропного. ВГЧ-6 репродуцируется в Т, Влимфоцитах и макрофагах, в большей степени поражая Тлимфоциты. Имеет тропизм к глиальным клеткам. Инфекция распространяется воздушнокапельным путем. ВГЧ6 постоянно обнаруживают в носоглоточной слизи и слюне инфицированных лиц. Возможно заражение при гемотрансфузиях, трансплантации органов, при использовании медицинских инструментов, контаминированных вирусом. Имеются сообщения о случаях заражения наркоманов, а также медицинских работников при случайных уколах иглой, содержащей кровь инфицированных или больных.

Исследования показали, что инфекция широко распространена среди людей. От 60 до 96% здоровых взрослых являются серопозитивными. У подавляющего большинства зараженных ВГЧ-6 формируется латентная инфекция. С этиологической ролью ВПГ6 связывают заболевания и клинические синдромы: острого лихорадочного заболевания, развитие внезапной экзантемы, мононуклеозоподобного синдрома. С ВГЧ-6 связывают развитие синдрома хронической усталости, для которого характерны: острое гриппоподобное начало с повышением температуры до 38°С, боли в горле, небольшое увеличение шейных, затылочных, подмышечных лимфоузлов, необъяснимая генерализованная мышечная слабость, мигрирующие миалгии, артралгии, расстройства сна, раздражительность, повышенная физическая утомляемость с последующей длительной усталостью. Для диагностики этой патологии используют молекулярнобиологические (ПЦР) и иммунохимические (ИФА) методы диагностики.

ПЦР-анализ на токсоплазму гондии

Исследуемый материал: кровь, соскоб, моча, биоптат, мокрота, спинномозговая жидкость (ликвор). Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Кусочек ткани объемом примерно 2 мм3, соскоб, мазок или спинномозговую жидкость 0,2 мл поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл. Мокрота и моча собираются утром в домашних условиях в одноразовые пластиковые пробирки объемом 10–15 мл.

Токсоплазмоз – паразитарное заболевание человека и животных, вызываемое токсоплазмами. В эпителии тонкого кишечника кошки и других кошачьих токсоплазмы проходят сложный жизненный цикл, завершающийся образованием мелких яйцевидных ооцист. Они могут вызывать у человека и животных тяжелое заболевание – токсоплазмоз. Источник инфекции – различные виды (свыше 180) домашних и диких животных (собаки, кошки, кролики, хищники, травоядные, грызуны и др.) и птиц. Заражение человека происходит при употреблении мясных продуктов и яиц, не прошедших достаточную термическую обработку. Не исключена возможность заражения при попадании возбудителя на слизистые оболочки и поврежденные кожные покровы трансмиссивным и другими путями. Наблюдается и внутриутробное заражение. Токсоплазмоз протекает с субфебрильной температурой, головной болью, увеличением лимфоузлов и печени, понижением работоспособности, может сопровождаться поражением глаз, сердца, нервной и других систем и органов. Заболевание может протекать и в латентной форме. Для распознавания используют методы серодиагностики и внутрикожную аллергическую пробу, ПЦР диагностика позволяет определить наличие в организме живого паразита по присутствию его ДНК в клиническом образце.

ПЦР-анализ на энтеровирус

Исследуемый материал: кровь с ЭДТА, ликвор, соскоб. Забор крови осуществляется в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА). Соскоб или спинномозговую жидкость (0,2 мл) поместить в стерильную пробирку типа "Эппендорф" объемом 1,5 мл.

Энтеровирусы относятся к семейству пикарновирусов. Энтеровирусная инфекция характеризуется многообразием клинических проявлений — от легких лихорадочных состояний до тяжелых миокардитов, менингитов, менингоэнцефалитов. Энтеровирусы кислотоустойчивы и относительно стабильны при низких значениях рН (<3,0), что позволяет им выживать в кислой среде желудка, а отсутствие оболочки делает их резистентными к действию желчных кислот. Энтеровирусная инфекция характеризуется многообразием клинических проявлений: от легких лихорадочных состояний до тяжелых миокардитов, менингитов, менингоэнцефалитов. Первичный очаг размножения локализован в эпителии рта, глотки, тонкой кишки, а также в лимфоидных тканях кольца ПироговаВальдейера и пейеровых бляшках. Возможно вторичное проникновение вируса из эпителия слизистых оболочек в лимфоидные ткани и кровоток (первичная вирусемия), а затем в различные органы и ЦНС. Основной путь передачи – фекальнооральный, возможен контактный путь передачи возбудителя с отделяемым носоглотки и через воду загрязненных водоемов.

Для энтеровирусной инфекции характерна сезонность с подъемом заболеваемости в летние месяцы. Инфицированный человек выделяет вирус в течение пяти недель. Естественный хозяин вируса – человек. Сложность этиологической расшифровки ИФА методом обусловлена значительным числом серологических вариантов. Этот метод недостаточно чувствителен и специфичен, требует исследования парных сывороток. Перспективным направлением лабораторной диагностики энтеровирусной инфекции является прямой метод выявления вируса с помощью ПЦР.

 




Читайте также:

» ПЦР-анализ
» Кристаллы мочевой кислоты
» Оксалаты в моче
» Эритроциты в моче
» Цилиндры в моче
» Фосфаты в моче
» Шаблоны описаний рентгенограмм